معقدات جلانجين - سايكلودكسترين الضامنة لتعزيز الذوبانية كعامل ناقل للدواء ومضاد للسرطان

الباحث

زينب سالم عباس

المشرف

غسان محمد سليمان

الجامعة

الجامعة التكنولوجية

الكلية / القسم

قسم العلوم التطبيقية / التقنيات الأحيائية

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Galangin; Cyclodextrin inclusion complexes; Drug delivery; Anticancer activity

تركزت الدراسة الحالية على تحضير مادة "الجلانجين" وتحميلها على "السايكلودكسترين" المتمثلة GAL / B-CDG بواسطة تقنية الترسيب النانوي لانها تعتبر بسيطة واقل كلفة .بقيت جزيئات-8 / GAL CD ذائبة في الماء بعد 24 ساعة عند حرارة 5 درجة مئوية , وتكون مسحوق ذائب بصورة كاملة في الماء. اعتمدت تقنيات التوصيف المختلفة مثل دراسة التحليل الطيفي للأشعة التحت الحمراء(؟7111 ) وحيود الاشعة السينية (XRD) وقياسات المجهر الألكتروني الماسح ( FESEM ) والمجهر الألكتروني للأرسال (TEM) ومجهر القوة الذرية (AFM) لتأكيد تكوين جزيئات GAL / B-CD النانوية . أظهرت أطياف الامتصاص من جزيئات (8-01 / GAL منحني امتصاص عند 360 نانومتر. تم استخدام (PTIR) لتقييم الحالات الجزيئية والمجموعات الوظيفية لجزيئات الجلانجين المحمل على السايكلودكسترين GAL / B-CD أكدت الدراسات (TEM ), (FESEM), (AFM), (XRD) وجود Gly ja نانوية Gl jal GAL / B-CD كانت كروية منتظمة ولها سطح أملس مع متوسط حجم يتراوح بين 32 - 13نانومتر. كانت الزيتا zeta - 63.14 mV وكانت الحركة V/cm 1.25- . تم استخدام فحوصات مضادات اكسدة GAL / B-CD ضد DPPH أظهرت النتائج اعتمادا على تركيز ضمن نطاق )2-50 ) مايكروغرام /مل له تأثير قوي بأزالة الجذور الحرة وجد أعلى مستوى ممكن من النشاط كمضاد أكسدة كان 92 % من GAL / B-CD عند 50 مايكروغرام / مل. اما في الجلانجين النقي لوحظ انخفاض بنسبة 8590 . و تم توضيح طريقة أكسدة الدهون بالثيوسانات الحديد و أظهر تثبيط بيروكسيد الدهون المعتمد على التركيز في نطاق (50-2 ) مايكروغرام/ مل كان أعلى مستوى 70 90 في GAL / B-CD وقد لوحظ انخفاض بنسبة 60 ”9 في الجلانجين النقي. أعطيت فعالية زانثين اوكسيديز باستخدام حامض البوليك حيث تم تثبيط نشاط اوكسيديز الزانثين في نطاق (50-2 ) مايكروغرام/ مل وكان أعلى مستوى 90 م؟ من GAL /B-CD وأظهر الجلانجين النقي انخفاضا بنسبة 82 90 . ان تبات مصل الدم تم تحقيقة و أظهرت النتائج انخفاض كبير في نسب حجم الجزيئات ل الجلانجين بعد توليفه مع 10 امن FBS مصل الجنين البقري وكان حجم جزيئاتة (1591و5003 )نانومتر.هذا مؤشر على تأثره بالضغط الاوزموزي وانفجار الجزيئات. لم يظهر نقصان حجم الجزيئات PS وعامل التشتت المتعدد PDI ل B-CD / ,0.41 طوال الوقت مما يشير الى انها كانت مستقرة في المصل لمدة 6 ساعات. تراوح حجم الجزيئات PS الخاصه GAL / B-CD من 30 الى 63 نانومتر . تم فحص سمية GAL / B-CD على كريات الدم الحمراء و أظهرت النتائج بأنه تسبب اقل نسبة من انحلال الدم اقل من 5 / مقارنة بالتراكيز الموجودة بالجلانجين النقي . تم تقييم تأثير السمية الخلوية ل(8-01 / GAL لخلايا خط سرطان الثدي MCF-7 gall باستخدام فحص (MTT) .أظهرت النتائج السمية الخلوية التي تعتمد على التركيز. لوحظت أعلى سمية خلوية (83.33 7%( بعد العلاج ب 50 مايكروغرام/ مل من GAL / B-CD بينما كانت نسبة السمية الخلوية 7 عند اقل تركيز 1.3 مايكروغرام/ مل. تسبب الجلانجين في انخفاض قيم السمية الخلوية بنسبة )64.33 ، 6.66 #)على التوالي. تم el yal فحص صبغة البنفسجي البلوري , حيث أظهرت سمية خلوية قوية لخلايا سرطان الثدي البشري 2101-7 . تمت دراسة موت الخلايا المبرمج في كلا الخطين الخلويين21001-7 و REF بعد العلاج ب GAL 8-00 / من خلال أنواع التقييمات , باستخدام أكريدين البرتقالي وبروميد إيثيديوم المزدوج, نشاط المايتوكوندريا مع صبغة 11123و الاليزا من اجل الكشف عن بروتين كاسباس -3 , وأظهرت النتائج أن GAL / B-CD يتسبب في موت الخلايا المبرمج . صممت هذه الدراسة في الجسم الحي لتقييم سمية GAL / B-CD في النموذج الحيواني. تم قياس المعلمات Agu حيث أظهرت أمراض الدم ، وانزيمات الكبد GOT / AST ,ALP ,GPT / ALT و وظائف الكلى اليوريا في الدم والكرياتينين في الدم وحامض اليوريك عدم وجود زيادة معنوية في كل من الجرعة 20,640 ملي غرام / كيلوغرام على التوالي بالمقارنة مع التحكم الصحي. لمزيد من التحقيق في تأثير GAL / B-CD بجرعتين 20,640 ملي غرام / كيلوغرام على ردود الفعل المناعية في الاعضاء الليمفاوية , تم حساب الوزن النسبي ومؤشرات أعضاء الفئران للطحال والغدة الصعترية. يمكن ملاحظة أن قيم مؤشرات الطحال والغدة الصعترية لم يكن لها فروق ذات ادلة إحصائية بين المجموعات المدروسة. وتم اجراء التشريح وعمل فحوصات نسيجية بعد 14 يوم من اعطاء الجرعة الفموية بجرعتين 20,640 ملي غرام / كيلوغرام. تظهر النتائج أن GAL / B-CD ليس له أي آثار جانبية حسب

In the present investigation, galangin and β-cyclodextrin (GAL/β-CD) inclusion complexes were prepared by the nanoprecipitation technique. GAL/β-CD stayed water soluble after 24 hours at 25°C. Different methods of characterization such as UV-Vis spectroscopy, Analysis of fourier transforms in infrared spectrum (FTIR), X- ray Diffraction technique (XRD), zeta potential analysis and particle size, Field emission scanning electron microscope (FESEM), transmission electron microscope (TEM) and atomic force microscope (AFM) studies were performed and confirmed the synthesis of nanoparticles. Where the UV-Vis spectroscopy analysis for GAL/β-CD showed high absorbance at 360 nm, FTIR analyses were conducted to evaluate the element and functioning groups of GAL/β-CD. XRD, FESEM, TEM and AFM studies confirmed the existences of GAL/β-CD. These results enhanced GAL/β-CD solubility also showed that the manufactured particles had a thin layer, a spherical form, and the diameter ranging between 13–32 nm. Zeta Potential was - 63.14 mV and mobility was 1.25 V/cm with the particle size 23.9 nm and PDI value 0.387. Antioxidant activity by DPPH radical scavenging assay was used in vitro to demonstrate concentration-dependent scavenging action in the 2-50 μg mL-1 range, with the highest level of activity possible of GAL/β-CD was 92.00% at 50 μg mL-1. In galangin, a decrease of level of hydrogen peroxide 85.00% was observed. The ferric thiocyanate on lipoperoxidation method was clarified by using galangin and GAL/β-CD and demonstrated concentration-dependent suppress lipid peroxidation in the 2-50 μg mL-1 range, at 50 μg mL-1, the highest level of activity was 70.00%. In galangin decrease level of activity to 60.00% was observed. Xanthine oxidase activity using uric acid was given. The galangin and GAL/β-CD inhibited xanthine oxidase activity in a concentration-dependent manner in the 2-50 μg mL-1 range, at 50 μg mL-1, the highest level of activity was 90.00 %. While galangin showed 82.00 % decrease. Serum stability in the presence of GAL/β-CD was investigated. The results demonstrates a drastically decreased PS value for galangin following its initial combination with 10% FBS (13591 vs. 5003 nm). In contrast, no significant changes in PS or PDI values of GAL/β-CD were seen throughout time, suggesting that they were stable in serum for 6 hours. The PS of GAL/β-CD ranged from 30 to 63.9 nm. The hemolytic toxicity of GAL/β-CD was investigated, the results showed that modified GAL/β-CD caused less hemolytic toxicity of RBCs (less than 5 %) in respect to the comparable amounts of galangin. The cytotoxicity effect of GAL/β-CD evaluated with the cell line MCF-7 utilizing the MTT assay. The outcomes revealed a concentration-dependent cytotoxicity. The highest cytotoxicity (83.33%) was observed following therapy by 50 μg mL-1 of GAL/β-CD, whereas the cytotoxicity was 11.67% at 3.1 μg mL-1. Galangin caused less cytotoxicity values of 64.33% and 6.66%, respectively. Crystal violet assay was carried, the GAL/β-CD award forceful cytotoxicity opposite MCF-7 cells. The apoptosis was studied in both cell lines after treatment with GAL/β-CD through types of assessments, which are by utilizing acridine orange & ethidium bromide, mitochondrial activity with Rh123 and ELISA assay with caspase-3 protein detection. The results revealed that GAL/β-CD only caused cell death mediated apoptosis, which was discovered by the above-mentioned assessments and increased nuclear morphological alterations. The in-vivo study of the toxicity in animal model was measured by the following parameters, hematological parameter, liver enzymes such as AST/GOT, ALP, and ALT/GPT were showed no significant effect (150,163 and 53 IU/L), (126, 145 and 48 IU/L) in both dosage 20 mg kg-1 and 640 mg kg-1 respectively in comparison with the healthy control (158, 147 and 56 IU/L) respectively, Kidney functions including blood urea, serum creatinine and uric acid showed no significant effect (47, 0.2 and 5 mg/dL), (41, 0.1 and 2 mg/dL) in both dosage 20 mg kg-1 and 640 mg kg-1 respectively in comparison with the healthy control (45, 0.1 and 3 mg/dL) respectively. To learn more about the consequences of GAL/β-CD at two dosages for immunological responses in the lymph organs, the relative weight and indices of organs mice for the spleen and thymus of mice were calculated .The values of spleen index when mice were given 20 and 640 mg kg-1 were 0.86± 0.09 and 0.87±0.08, respectivly, whereas those for the thymus were 0.82±0.06 and 0.82±0.09, respectivly. It can be seen that the values of the indices of the spleen and thymus had no significant differences among the studied groups. And histopathological were estimated after 14 days of oral dose with two doses 20 mg kg−1 and 640 mg kg−1. Our results demonstrate that GAL/β-CD had no side effects according to high dose 640 mg Kg−1.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب