الكشف الميكروبي بتقنية PCR في الوقت الحقيقي وتقييم السايتوكينات لدى مرضى التهاب حوائط التاج
Microbiological Detection by Real Time PCR and Cytokines Assessment in Patients with Pericoronitis
- الباحث
- أحمد نبيل قاسم
- المشرف
- بهاء حمدي حكيم - سهى عبد الحسين هندي
- الجامعة
- جامعة بابل
- الكلية / القسم
- طب الأسنان / الأحياء المجهرية
- الشهادة
- ماجستير
- السنة
- 2023
- لغة الرسالة
- انكليزي
- الكلمات المفتاحية
- Pericoronitis;Real time PCR;Cytokines;Oral bacteria
الملخص
يشير مصطلح "التهاب حوائط التاج" إلى حالة التهاب في الأنسجة الرخوة في الفم، والتي تحدث نتيجة لإصابة اللثة والجيوب اللثوية بالقرب من سن غير ناضج. Sale ما تتسارع هذه العملية بسبب تراكم بقايا الطعام بالقرب من التاج والإصابات التي تسببها الأسنان المعاكسة في الأنسجة المحيطة به. يعتبر التهاب حوائط التاج التهابًا يؤثرفي الأنسجة الرخوة المحيطة بتاج السن الثالث في الفك السفلي، سواء كان السن جزئيًا ظاهرا او LIS مطمورء أيضا يحدث هذا الالتهاب نتيجة تراكم بكتيريا الفم المتنوعة. تهدف هذه الدراسة إلى تحديد البكتيريا الرئيسية المسببة لالتهاب حوائط التاج وتقييم مستويات الانترلوكين-8 وعامل النمو التحويلي بيتا-1 في منطقة التهاب حوائط التاج . تم الحصول على موافقة جميع المشاركين في هذه الدراسة Lady لنموذج الموافقة المعتمد. تم تشخيص خمسين مريضًا (50) بالتهاب حوائط التاج، وهم (33) أنثى و (17) ذكرّاء بينما تم اختيار ثلاثين بالغًا )30( سليمًا يعملون كمجموعة ضابطة في الدراسة. تم تضمين الأفراد البالغين الذين تتجاوز أعمارهم 16 Lale في هذه الدراسة , تم جمع عينات من نسيج التهاب حوائط التاج عن طريق عزل الضرس الثالث السفلي وتجفيف المنطقة باستخدام Aide هوائية، ثم تم إدخال نقطة ورقية في جيوب التاج حتى تم الشعور بالمقاومة لمدة 30 ثانية، ثم تم وضع النقطة الورقية في أنبوب إيبندورف يحتوي على محلول فوسفات وتخزينه في درجة حرارة (-20 درجة مئوية) في الفريزر العميق حتى يتم استخدامها في تقنية تفاعل البلمرة الوقت الحقيقي. تم جمع عينات اللعاب عن طريق غسل الفم بماء مقطر (10 مل) لمدة 60-30 ثانية لضمان إزالة أي رواسب. ثم بعد دقيقتين من تراكم اللعاب في فم المريض تم ارشاد المريض لبصق اللعاب المجمع في الوعاء المستقبل. تم تركيز عينات اللعاب غير المحفزة التي تحتوي على 2 مل في جهاز الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة بسرعة 4000 دورة في الدقيقة؛ تم سحب السوائل الفوقية الشفافة عن طريق شفطها ووضعها في أنابيب عادية لكي تُحفظ في درجة حرارة (-20 درجة مئوية) في الفريزر clay Gell الدراسة النهائية للاختبار الإنزيمي المرتبط بالمناعة. أظهرت سجلات هذه الدراسة نتائج إيجابية بنسبة )64( في الكشف الجزيئي لبكتيريا عصوية المكورات ذات الصبغة الإيجابية. كما وقد أظهرت نسبة )%58( من العينات نتائج إيجابية لبكتيريا العصوائية الميلانينية ذات الصبغة السالبة ، وكذلك نسبة )%36( نتائج إيجابية لبكتيريا Dy AG فورسائيا ld الصبغة السالبة .تم استخدام تقنية مقايسة الامتصاصية المناعية للانزيم المرتبط لغرض قياس مستويات انترلوكين-8 وايضا" مستويات عامل النمو التحويلي نوع بيتا-1 في لعاب مرضى التهاب حوائط التاج. كما وقد أظهرت النتائج أن تركيز إنترلوكين-8 وعامل النمو التحويلي بيتا-1 أعلى في مرضى التهاب حوائط التاج بالمقارنة مع مجموعة السيطرة وقد كان متوسط تركيز إنترلوكين-8 في لعاب المرضى هو )28,14145.66(، بينما كانت مجموعة السيطرة هي )13.03453.16(، وكان هنالك فروق ذات دلالة إحصائية عالية جدا بين مجموعة التهاب حوائط التاج ومجموعة السيطرة. كما وقد أظهرت مستويات عامل النمو التحولي2 بيتا-1 في اللعاب لمرضى التهاب حوائط التاج والمجموعة السيطرة فروقًا إحصائية Iba Ale وقد كان الارتباط وثيق جدا" بين الانترلوكين-8 وعامل النمو التحويلي نوع بيتا-1 في مرضى التهاب حوائط التاج عن الاشخاص الغير
Abstract
The word "pericoronitis" refers to an inflammation of the soft tissues in the mouth caused by an infection of the gingiva and dental follicle, which are close to the crown of an immature tooth. It is commonly accepted that this process is accelerated by the accumulation of food particles near the opercula (the flap of gum tissue that partially covers an erupted tooth) and the occlusal force of the opposite tooth cause injury to the tissues in the pericoronal region. The study was done at the University of Babylon College of Dentistry and in the private clinic from January 2022 to June 2022. Fifty patients (n=50) have been diagnosed with pericoronitis, are (33) females and (17) males, and thirty (n=30) healthy adults serving as the study controls group. The age groups studied were above 16 years. Swabs are collected by isolation of the lower third molar and dry area by air syringe then a sterile 3 paper point is inserted in pericoronal pockets until resistance felled for 30 seconds and then the paper point is put in an Eppendorf tube containing phosphate buffer solution and stored at (-20C) deep freeze until it is used for real-time PCR technique. Saliva collected, rinse the mouth with distilled water (10ml) for 30-60 seconds to ensure the removal of any debris. After 2 minutes of saliva accumulation in the patient's mouth, the patient was instructed to spit the collected saliva into the receiving vessel. Unstimulated saliva samples containing 2 ml are centrifuged for 15 minutes at 4000 rpm; the clear supernatant is eliminated, pipetted into plain tubes, and kept at (-20 C) in a deep freezer to make the final immunological examination study by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test. The results displayed about (64%) of the sample’s positive results in molecular detection for gram-positive Streptococcus mutans. Also showed that about (58%) of the samples had positive results for gram-negative Prevotella intermedia and (36%) positive for gram-negative Tannerella forsythia. The Immunological study used enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to determine Interleukin - 8 (IL-8) and Transforming growth factor beta - 1 (TGF- B1) concentration in the saliva of pericoronitis patients. The result showed the concentration of Interleukin-8 and Transforming growth factor-beta 1 is higher in patients with pericoronitis infection than in control. The mean±S.D concentration of Interleukin-8 in saliva for patients is (145.66±28.1) while the control group is (53.16±13.03) which has a highly significant statistical (p-value 000) between pericoronitis and control group. The level of Transforming growth factor-beta 1 in the saliva of patients with pericoronitis and control groups highly significant statistics(p=000). The correlation of immune parameters Interleukin-8 and transforming growth factor- beta 1 is visible in pericoronitis patients through the strong correlation among them (p=000).
طلب نسخة من الملف
الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.