تدعيم الخبز المحلي بالسيلينيوم وتأثيره على بعض المؤشرات التغذوية لذكور الفئران والخط الخلوي السرطاني A549

الباحث

ختام طه كاظم الحجامي

المشرف

أ.د. رياض شمخي علي الموسوي

الجامعة

جامعة الكوفة

الكلية / القسم

الزراعة / علوم الأغذية

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

تدعيم الخبز;السيلينيوم;الفئران;الخط الخلوي A549

نفذت التجربة في البيت الحيواني العائد للمركز العراقي لابحاث السرطان والوراثة الطبية / بغداد ، وهدفت الدراسة الحالية الى تصنيع خبز مدعم بتراكيز مختلفة من السيلينيوم (50, 100, 150, 200) مايكروغرام وتغذية حيوانات التجارب عليها ولقد استعمل في هذه الدراسة AQ حيوانا من ذكور الفئثران من نوع Albino (بيضاء اللون) ، وكانت الفئران المستعملة في التجربة ناضجة بعمر6 أسابيع وبوزن 32-28غم مقسمة على خمسه معاملات (مجاميع) كل معاملة تتضمن 8 فئران غذيت المجموعة الأولى (C) خبز من دون معاملة اعتبرت مجموعة السيطرة، المجموعة الثانية (B1) تم إعطاؤها الخبز المدعم في السيلينيوم وبتركيز(50 مايكروغرام/كغم) ، المجموعة Ail (82) تم إعطاؤها الخبز المدعم في السيلينيوم وبتركيز(100 مايكروغرام/كغم)،المجموعة الرابعة (83) تم إعطاؤها الخبز المدعم في السيلينيوم وبتركيز(150 مايكروغرام/كغم)،المجموعة الخامسة (84) تم إعطاؤها الخبز المدعم في السيلينيوم وبتركيز(200مايكروغرام/كغم)، وذلك لمعرفة تأثير الخبز المدعم في السيلينيوم في بعض الصفات الدمية (خلايا الدم البيضاء WBC © كريات الدم الحمراء RBC ، الهيموكلوبين Hb ، وخلايا الدم المرصوصة (PCV والصفات الكيميوحيوية في مصل الدم ومستوى الدهون (الكليسرات الثلاثية ، الكولسترول ، (VLDL ، LDL ، HDL وانزيمات الكبد (ALP, ALT) ومستوى الكلوكوز و0223 اولا: cu Si التجربة التغذوية بهدف تقييم اداء التغذية بالخبز المدعم في السيلينيوم ومدى مساهمته في بعض المؤشرات التغذوية ويمكن ايجاز النتائج المتحصل عليها بالاتي: GI .1 للسيلينيوم تأثير معنوي إِذّْ حدت التغذية بالخبزالمدعم في السيلينيوم من الزيادة الوزنية النهائية لحيوانات التجارب المغذاة على الخبز المدعم في السيلينيوم بالتراكيز الاتية 150,100,50 ميكروغرام من السيلينيوم والمتمثلة بالمعاملات 83,82,81 على التوالي اذ بلغت (31.12، 7 , 30.71( غم على التوالي مقارنة مع السيطرة C والبالغة 34.88 غم في حين لوحظ فرق حسابي بالمعاملة 84 ذات التركيز 200 مايكروغرام والبالغة 31.28 غم مقارنة بالسيطرة) GI 2 للسيلينيوم تأثير معنوي إِذْ حسنت التغذية بالخبزالمدعم في السيلينيوم من كفاءة الجهاز المناعي بزيادة الاعداد الكلية لخلايا الدم البيضاء WBC وخلايا الدم الحمراء RBC والنسبة المئوية لحجم مضغوط الخلايا PCV مقارنة مع معاملة السيطرة في حين لم تكن هناك فروق ذات دلالة احصائية في مستوى الهيموغلوبين Hb بالمقارنة مع السيطرة © إِذْ بلغت اعلى نسبة ذات التركيز 100 مايكروغرام سيلينيوم والبالغة B2 من عدد كريات الدم البيضاء عند المعاملة xX 7.53 107خلية/لتر تلتها المجموعة 84 ذات التركيز 200سيلينيوم اذ بلغت x 8.41 103خلية/لتر خلية/لتر اما في x 5.02 3خلية/لتر مقارنة مع السيطرة © والبالغة المجموعتيتن 83 و81 لايوجد فرق معنوي مقارنة بالسيطرة . اما في مستوى كريات الدم (B2,B3,B4) لوحظ وجود تفوق معنوي في كل المجاميع المعاملة في السيلينيوم RBC الحمراء اظهرت معاملتي PCV يخص النسبة المئوية لحجم مضغوط الخلايا Lad مقارنة بالسيطرة 0 ¢ اما ذات التركيز 150,200 مايكروغرام تفوق معنوي مقارنة مع (B3,B4) الخبزالمدعم بالسيلينيوم Cc ووبالمقارنة مع مجموعة السيطرة (B2, Bl) مجموعة معاملات حافظ الخبز المدعم بالسيلينيوم على تركيز الكولسترول الكلي والسكر والبروتينات الدهنية .3 اذ لم يلحظ وجود فروق معنوية للصفات المذكورة بين مجاميع الفئران التي LD منخفضة الكثافة تمت تغذيتها بالخبز المدعم بالسيلينيوم ومعاملة السيطرة © اما الكليسيريدات الثلاثية وجود ارتفاع / واللذان بلغتا (177.16، 190.64) ملغم (B4, B2) معنوي بين مجموعة فئران المعاملة البالغة 84.06 ملغم / 100 مل كما لم تظهر C على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة 0 Lal والبالغتين (132.96, 134.71) ملغم / 100 مل (B3, 81( فروق معنوية بين المعاملة يتبين من جدول VLDL بمعاملة السيطرة ') اما بالنسبة للبروتينات الدهنية واطئة الكثافة جدا إذ كانت عند Bd قيمة سجلتها المعاملة lel التحليل الاحصائي اعلاه وجود ارتفاع معنوي إذ أن 35.43 المعاملة 182 وبقيمة ili التركيز 200مايكروغرام وبواقع 38.12 ملغم / 100 مل ملغم / 100 مل مقارنة بمعاملة السيطرة ) والبالغة 16.81 ملغم / 100 مل في حين سجلت اقل فيما Lal وبتقدير 26.60 و 26.95 ملغم / 100 مل على التوالي B35 BI قيمة عند المعاملتين 54.46 يخص الدهون الجيدة لوحظ انخفاض معنوي عند المعاملات (83,82 ,84) اذ سجلوا( 100 / ملغم / 100 مل مقارنة مع معاملة السيطرة ') اذ بلغت 91.37 ملغم )2.77 ، 0 مل اما المعاملة 81 لم يظهر فرق معنوي وقد سجلت (95.13 ملغم / 100 مل) بالمقارنة مع الكثافة Ale مجموعة السيطرة ©ءاذ يلاحظ من النتائج ان هناك انخفاض في البروتينات الدهنية عند مجاميع الفئران التي تمت تغذيتها بالخبز المدعم بالسيلينيوم أذ لم نلاحظ فروق معنوية ) ALP,ALT) 4.حافظ الخبز المدعم بالسيلينيوم على انزيمات الكبد في كلا الانزيمين في مجاميع الفئران التي تغذت على الخبز المدعم بالسيلينيوم ومجموعة السيطرة في المعاملتين AST لوحظ ارتفاع مستوى انزيم الأسبارتيت الناقل للأمين AST أما الانزيم إذ بلغتا )452.05 ,560.75( ملغم / 100 مل على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة B2 ,1 إذ ) 84, B3), إذ سجلت (190.53) ملغم / 100 مل بينما لم أجد فرق معنوي في المعاملتين © O) © ملغم / 100 مل على التوالي مقارنة مع مجموعة السيطرة (192.30 ،263.76( Leh قد يعود الى التاثيرات المضادة للاكسدة للسيلينيوم AST الزيادة الحاصلة في نشاط انزيم ، حسنت التغذية بالخبزالمدعم في السيلينيوم من نشاط انزيم الكلوتاثيون بيروكسيديز وفعاليته .5 وجود تفوق معنوي بين مجموعة الفئران (81) التي تمت تغذيتها بالخبز المدعم بالسيلينيوم إذ Al سجلت أعلى نسبة والتي بلغت (18.08) مايكرومول / مل كما ارتفع مستوى الانزيم عند المعاملتين (84,82) اذ سجلتا )16.95,16.51( مايكرومول / مل بالمقارنة مع مجموعة لم نلحظ فرق معنوي في مستوى الانزيم Lad والتي بلغت (14.48) مايكرومول / مل C السيطرة بالمجموعة 83 اذ سجلت (12.04) مايكرومول / مل مقارنة بالسيطرة © ، إِنَّ زيادة نشاط انزيم الكلوتاثيون بيروكسديز يحسن من حالة مضادات الأكسدة ومنع تكوين الجذور الحرة ودعم الجهاز المناعي. أشارت نتائج التقييم الحسي إلى تفوق معنوي لصالح معاملات الخبزالمدعم في السيلينيوم في .6 صفة لون الطبقة العليا ، وصفة لون الطبقة السفلى وتجانس عملية الخبيز وقابلية المضغ وصفة القبول العام، في حين لم يلاحظ اي فروق معنوية بين معاملات التجربة بالمقارنة مع السيطرة في . صفات (الرائحة ، والطعم ، وانتظام الشكل الخارجي) A549 ثانيا : تضمنت الدراسة الحالية دراسة تأثير السيلينيوم على الخط الخلوي السرطاني الخاص بسرطان الرئة والخط الخلوي الطبيعي 77721.68 والتي تم الحصول عليها من جامعة ملاياء كلية الطب؛ مركز التحري عن العلاجات الجديدة في ماليزيا من اجل تقييم تأثير السيلينيوم ولأجل MTT على نمو خلايا الخط السرطاني من خلال عدة اختبارات منها اختبار صبغة التحري عن السمية الخلوية للسيلينيوم ومعرفة كفاءته للعمل كمضاد تجاه نمو خلايا سرطان الرئة High استعملت اربعة تراكيز 25 , 50 ، 100 2006 ، 400 ميكروغرام/مل من خلال اختبار ومن اهم النتائج التي تم التوصل إليها: Content Screening(HCS) السيلينيوم يمتلك سمية خلوية ضد الأورام السرطانية من خلال تأثيرها على خلايا Gi وجد .1 ومقارنته مع خط الخلايا الطبيعية 718/1168 وتعتمد درجة A549 الخط الخلوي السرطاني تأثيره على التركيز ، فقد وجد أنَّ الفعالية المضادة للأورام تتناسب طرديا مع ازدياد التركيز (50) ،25) كانت قيمة التثبيط )11.92, 26.77, 35.88, 48.53, 59.06( وللتراكيز Y للسيلينيوم مايكروغرام /مل على التوالي لخط الخلايا السرطاني اما خط الخلايا الطبيعية (400 ،200 +100 4) فبلغت على النحو الاتي (4.94, 11.38, 16.63, 24.77, 32.08) للتراكيز نفسه 8 ale بلغ 100 للخلايا السرطانية 88,89 مايكرو غرام /مل وللخلايا الطبيعية 191,3 مايكرو تم اختيار السيلينيوم لدراسة السمية الخلوية من MTT /مل ومن خلال نتائج الاختبار High content screening (HCS) خلال وعن طريق قياس التغييرات التي تحدث High content screening (HCS)D& من .2 Mitochondrial في بعض المؤشرات الخلوية والتي تشمل نفاذية غشاء المايتوكوندريا ومستوى 9 Nuclear intensity والمحتوى النووي للخلايا membrane potential (MMP) ونفاذية غشاء الخلية Viable cell count وعدد الخلايا C تحرر السايتوكروم إِذْ استعملت اربعة تراكيز(200,150,100:50) Cytoplasmic membrane potential للسيلينيوم تأثير واضح على المعالم الخلوية عند التراكيز GF ومن خلال نتائج هذا الاختبار لوحظ العالية، في حين يقل او ينعدم في التراكيز الأدنى إِذْ لوحظ تفوق معنوي على عدد الخلايا الحية تأثيره Lal ونفاذية غشاء المايتوكوندريا يكون عند التراكيز200 و150 و100 ميكروغرام/ملء Lain فيكون عند التركيز 200 ميكروغرام/مل ، C على المحتوى النووي ومستوى السايتوكروم يكون تأثيره ضعيف على الخلايا عند التراكيز الأخرى 6 أما تأثيره على نفاذية الخلية كان عند .

e experiment was carried out in the animal house of the Iraqi Center for Cancer Research and Medical Genetics / Baghdad, the current study aimed to manufacture bread fortified with different concentrations of selenium (50, 100, 150, 200) μg and feed experimental animals on them. 40 male Albino mice (white) were used in this study. The mice used in the experiment were 6 weeks old, mature, weighing 28-32 g, divided into five treatments (groups), each treatment included 8 mice, the first group (C) was fed bread without treatment as the control group, the second group (B1) was given bread fortified with selenium at a concentration (50 μg/kg), the third group (B2) was given bread fortified with selenium at a concentration (100 μg/kg). The fourth group (B3) was given bread fortified with selenium at a concentration (150 μg/kg), and the fifth group (B4) was given bread fortified with selenium at a concentration (200 μg/kg), In order to know the effect of bread fortified with selenium on some blood traits (white blood cells WBC, red blood cells RBC, hemoglobin Hb, and Packed Cell Volume PCV), the biochemical characteristics in the blood serum and the level of fats (triglycerides, cholesterol, HDL, LDL, VLDL) and enzymes Liver (ALP, ALT), glucose level and GPX. First: The nutritional experiment was conducted with the aim of evaluating the nutritional performance of bread fortified with selenium and the extent of its contribution to some nutritional indicators.The obtained results can be summarized as follows: 1- Selenium had a significant effect as feeding with bread fortified with selenium limited the final weight gain of experimental animals fed on bread fortified with selenium at the following concentrations, 50,100,150 μg of selenium, represented by treatments B1, B2, B3, respectively, which it reached (31.12, 27.57 ,30.71 )g, respectively, compared with control C, which amounted to 34.88 g, whereas, an arithmetical difference was observed in the treatment B4 with a concentration of 200 μg which amounted 31.28 g compared to the control C. 2- Selenium had a significant effect as feeding with bread fortified with selenium improved the efficiency of the immune system by increasing the total numbers of WBC and RBC and the PCV B compared with the control treatment while there were no statistically significant differences in the level of hemoglobin (Hb) compared with control C, the highest percentage of white blood cells in treatment B2 with a concentration of 100 μg selenium, which amounted to 8.41 x 103 cells/L, was followed by group B4 with a concentration of 200 selenium, which amounted to 7.53 x 103 cells/L compared to control C which was 5.02 x 103 cells/L cells/L. While In the two groups B3 and B1, there is no significant difference compared to the control. As for the level of red blood cells RBC, a significant superiority was observed in all groups treated with selenium (B2,B3,B4) compared to the C control, As for the percentage of the Packed Cell Volume PCV cells, the two treatments of selenium-fortified bread (B3, B4) with a concentration of (150,200) μg showed significant superiority compared to the group of treatments (B1, B2) and compared with the control group C. 3- The selenium-fortified bread maintained the concentration of total cholesterol, sugar and low-density lipoproteins (LDL). No significant differences were observed for the mentioned traits between groups of mice fed with selenium-fortified bread and the control C treatment. As for the triglycerides, there was a significant increase among the treated group of mice (B2, B4), which reached (177.16, 190.64) mg/100 ml, respectively, compared to the control C treatment, which amounted to 84.06 mg/100 ml. Also, there were no significant differences between treatment (B1, B3) which were (132.96, 134.71) mg/100 ml compared to control treatment (C). As for very low density lipoproteins (VLDL), it appears from the table of statistical analysis above that there is a significant increase, as the highest value recorded by treatment B4 It was at a concentration of 200 μg and at a rate of 38.12 mg / 100 ml, It was followed by treatment B2 with a value of 35.43 mg / 100 ml compared to control treatment C, which amounted to 16.81 mg / 100 ml, while the lowest value was recorded in treatments B1 and B3 with an estimate of 26.60 and 26.95 mg / 100 ml, respectively. As for the good fats, a significant decrease was observed in treatments (B2, B3,B4), as they recorded (54.46, 47.10, 40.77) mg / 100 ml compared with the control treatment C, which amounted to 91.37 mg / 100 ml, while treatment B1 did not show a significant difference recorded (95.13 mg/100 mL) as compared to the control group, It was noted from the results that there was a decrease in high-density lipoproteins in groups of mice fed selenium-fortified bread. 4- The selenium-fortified bread maintained the liver enzymes (ALP, ALT, as we did not notice significant differences in both enzymes in groups of mice fed selenium-fortified bread and the control group. As for the AST enzyme, the level of the aspartate aminotransferase enzyme AST was elevated in treatments B1 and B2, reaching (560.75, 452.05) mg/100 ml, respectively, compared to the control treatment C, which recorded (190.53) mg/100 ml, while I did not find a significant difference in the two treatments (B3, B4), they were (263.76, 192.30) mg / 100 ml respectively compared to the control group C. The increase in AST enzyme activity may be due to the antioxidant effects of selenium. 5- Feeding with bread fortified with selenium improved the activity and effectiveness of the enzyme glutathione peroxidase, as there was a significant superiority between the group of (B1) mice that were fed with bread fortified with selenium, which recorded the highest percentage, which reached (18.08) micromol/ml. The level of the enzyme also increased in the two treatments (B2 and B4), which recorded (16.95,16.51) micromoles / ml respectively compared to the control group C, which amounted to (14.48) micromol / ml, while we did not notice a significant difference in the level of the enzyme in group B3, which recorded (12.04) micromoles / ml compared to control C, Increasing the activity of the enzyme glutathione peroxidase improves antioxidant status, prevents the formation of free radicals, and supports the immune system. 6- The results of the sensory evaluation indicated a significant superiority in favor of the selenium-fortified bread treatments in the color of the upper layer, the color of the lower layer, homogeneity of the baking process, chewing ability and general acceptance, while no significant differences were observed between the experimental treatments compared to the control in the characteristics (smell, taste , and regularity of the external form). D Second: The current study included a study of the effect of selenium on the cancer cell line A549 of lung cancer and the normal cell line WRL68, which was obtained from the University of Malaya, College of Medicine, Center for Investigation of New Therapies in Malaysia in order to evaluate the effect of selenium on the growth of cancer line cells through Several tests including MTT dye test, In order to investigate the cellular toxicity of selenium and know its efficiency to act as an antidote to the growth of lung cancer cells, four concentrations of 50, 25, 100, 200 and 400 μg/ml were used through the High Content Screening (HCS) test. The most important results that were reached: 1- It was found that selenium has cytotoxicity against cancerous tumors through its effect on the cells of the cancer cell line A549 and compared it with the normal cell line WRL68 and the degree of its effect depends on the concentration, It was found that the anti-tumor activity is directly proportional to the increase in the concentration of selenium, as the inhibition value was (11.92, 26.77, 35.88, 48.53, 59.06) and for concentrations (25, 50, 100, 200, 400) μg/ml, respectively, for the cancer cell line and for the cell line while for the normal cell line WRL68, the results were (4.94, 11.38, 16.63, 24.77, 32.08) for the same concentrations, the IC50 for cancer cells was 88.89 μg/ml and for normal cells was 191.3 μg/ml. Through the results of the MTT test, selenium was selected for cytotoxicity study through High content screening (HCS). 2- Through High content screening (HCS) and by measuring changes in some cellular parameters including mitochondrial membrane potential (MMP), nuclear intensity, cytochrome C level, viable cell count and cytoplasmic membrane potential (MMP), four concentrations (50, 100, 150, 200) μg were used. Through the results of this test, it was observed that selenium has a clear effect on cellular parameters at high concentrations, while it is reduced or absent at lower concentrations. A significant superiority was observed on the number of living cells and the permeability of the mitochondrial membrane at concentrations 100, 150 and 200 μg/ml. As for its effect on the nuclear content and the level of cytochrome C, it is at a concentration of 200 μg/ml, while its effect E is weak on cells at other concentrations, as for its effect on cell permeability, it was at a concentration of 150,200 μg/ml and was not effective at other concentrations. E is weak on cells at other concentrations, as for its effect on cell permeability, it was at a concentration of 150,200 ug/ml and was not effective at other concentrations.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب