عزل وتشخيص الفطر Botrytis cinerea المسبب لمرض العفن الرمادي على الطماطة ومكافحته أحيائياً وكيميائياً
Isolation and Identification of Botrytis cinerea Causing Gray Mold on Tomato and its Biological and Chemical Control
- الباحث
- محمد رضا حسين احمد الموسوي
- المشرف
- أ.م.د. فراس علي احمد الركابي
- الجامعة
- جامعة الكوفة
- الكلية / القسم
- الزراعة / وقاية النبات
- الشهادة
- ماجستير
- السنة
- 2022
- لغة الرسالة
- عربي
- الكلمات المفتاحية
- Botrytis cinerea;العفن الرمادي;الطماطة;المكافحة الأحيائية
الملخص
أجريت هذه الدراسة في كلية الزراعة / جامعة الكوفة / القزوينية بهدف عزل وتشخيص الفطر الممرض Botrytis cinerea المسبب لمرض العفن الرمادي على ثمار الطماطة، وتقييم فعالية كل من بكتيريا المقاومة الإحيائية Bacillus amyloliquefaciens BOT و الكايتوسان و حامض الساليسالك وبعدة تراكيزفي تثبيط الفطر الممرض ¢ ودور هذه العوامل عند تطبيقها رشا على النباتات ما قبل الجني في البيت البلاستيكي، ولثلاث مراحل من نضج الثمار Turning) و Pink و (Light Red ودروها في زيادة نشاط بعض الإنزيمات مثل إنزيم Peroxidase (POD) و إنزيم Phenalnine ammonia-lyase (PAL) والتي لها علاقة بأستحثاث المقاومة وتعزيزها. وتقييم دورها في عمر الخزن وتقليل الخسائر مابعد الجني . فضلا عن دراسة قدرة الفطر على تكوين الغشاء الخلوي (Biofilm) الذي يعد من أهم عوامل الضراوة لمسببات الأمراض ودور تلك العوامل على منع تكوين الغشاء الخلوي. أظهرت نتائج اختبارات الأمراضية لعزلات العشرة الفطر الممرض والتي جمعت من مناطق مختلفة إلى تفوق العزلة الفطر الممرض B. cinerea (B.C3) من Gus شدة الأمراضية على نباتات الطماطة أيجين و الثمار و الأوراق كما كان لها تأثيريا معنويا على معدل قطر الجزء المتضرر على الثمار والأوراق 2.58 و 3.00 سم على التوالي ، أكدت نتائج التشخيص الجزيئي تطابق العزلة 8.03 بنسبة 9/099 مقارنة مع العزلات العالمية المسترجعة من بنك الجينات العالمية National Center for (NCBI) Biotechnology Information . وتم تسجيل العزلة تحت رقم المدخل OP257237 وبينت نتائج اختبار العوامل المدروسة على الوسط الزرعي ,.(2.1 . أن لبكتيريا المقاومة الإحيائية القدرة على تثبيط نمو الفطر الممرض عند استعمالها بطريقتي التخطيط المزدوج و المربع وبمدد زمنية مختلفة حيث تفوقت طريقة التخطيط المزدوج في تثبيط الفطر والتي بلغت بعد مرور 5 أيام نسبة تثبيط 090 مقارنة مع طريقة التخطيط ،ay pall والتي أعطت نسبة تثبيط 9070 لنفس الفترة. كما أدى استعمال الكايتوسان بعدة تراكيز(250 إلى 2000 ملغم/لتر) إلى تفوق معنوي لتركيز 0 ملغم/لتر على سائر التراكيز الآخرى في تثبيط الفطر الممرض cinerea .8 .وكان لاستعمال الساليسالك بتركيز 250 ملغم/لتر تفوق معنوي في تثبيط الفطر الممرض مقارنة مع معاملة السيطرة والتراكيز الأقل. وبينت نتائج دراسة تكوين الغشاء الخلوي إلى قدرة الفطر .7 على تكوينه مختبريا وكان لبكتيريا المقاومة الإحيائية تأثير معنوي في تثبيطه مقارنة مع معاملة السيطرة. وتم الأستدلال على تكوين الغشاء الخلوي من خلال قياس معدل درجة الأمتصاص حيث بلغ المعدل في معاملة البكتيريا 0.19 (OD) في Cus بلغ المعدل في معاملة السيطرة 1.8 (OD) متفوقة بذلك على الكايتوسان والساليسالك ، فضلا عن تفوقها في تثبيط معدل عدد السبورات النابتة للفطر الممرض. حقليا أظهرت نتائج تطبيق el gall على مراحل النضج Turning) و Pink و (Light Red إلى تفوق معاملة البكتيريا بتركيز 105 / مل في زيادة نشاط وفعالية كل من إنزيم ال(201 و PAL حيث أدت المعاملة إلى زيادة نشاط إنزيم POD إلى 20.03 و 19.2 و 19.03 دقيقة/غم وزن طري مقارنة مع معاملة السيطرة حيث بلغ مستوى الإنزيم 8.13 و 6.42 و 6.3 دقيقة/غم وزن طري وعلى التوالي فضلا عن تفوق البكتيريا على سائر المعاملات es SY) وأثرت معنويا على إنزيم PAL Sl) حيث أدت لزيادة Ay pine في مستوى الإنزيم إلى 38.5 و 37.63 و 35.25 ملغم/غرام وزن طري على التتابع للمراحل الثلاث من نضج الثمار مقارنة مع معاملة السيطرة والتي بلغ فيها مستوى الإنزيم 22.03 و21.07 و20.97 ملغم/غم وزن طري على التوالي لمراحل النضج.
Abstract
The study was conducted in the College of Agriculture/University of Kufa /Qazwiniya, with the aim of isolation and diagnostic the fungus (Bortytis cinerea) that causes gray mold disease on tomato and evaluating the effectiveness of both the bio agent bacteria (Bacillus amyloliquefacens B07), chitosan and salicylic acid in different concentrations and their roles as preharvest application in three stages(Light Red,Pink,Turning) on postharvest tomato in the greenhouse. In addition, studying the roles of these three factors in increasing the activity of some enzymes like,Peroxidease enzyme (POD) enzyme and Phenealalanine ammonia- Lyase (PAL) enzyme which is related to inducing and enhancing ISR resistance and evaluating its role in storage and reducing post-harvest losses.As well as studying the ability of fungus to form a fungal biofilm, which is one of the most important virulence agent and the role of those factors in preventing the formation of the biofilm. The results of the pathogenicity tests showed that the isolate of Botrytis cinerea (B.C3) was the most pathogenic isolates in terms of disease severity on tomato plants, fruits and leaves, where the isolate was given the number 4 from the scale of 0-5 for disease severity. It also had a significant effect on the average diameter of the damaged part on fruits and leaves 2.58 and 3 cm, respectively. The results of the molecular diagnosis confirmed that the B.C3 isolate is 99% compared to the global isolates from the National Center for Biotechnology Information (NCBI). In addition, the B.C3 isolate was registered in the Gene Bank under the accession number OP257237. The results of factors efficacy in inhibition the pathogenic fungus Botrytis cinerea B.C3 on P.D.A media showed that the bio agent bacteria have the ability to inhibit the growth of B.cinerea when used in double and square streak methods and at intervals. At different time, the double streak method was superior in inhibiting the fungus, which after 5 days resulted in 90% inhibition compared to the square streak method, which showed 70% inhibition for the same period. The use of chitosan in several concentrations led to a significant effect of the concentration of 2000 mg / liter over all other concentrations. The use of salicylic at a concentration of 250 mg/L had a significant effect in inhibiting the pathogenic fungus compared with the control treatment. The results of biofilm formation also showed the ability of B. cinerea to form a biofilm layer in the laboratory, and the bio agent bacteria had a significant effect on its inhibition compared to the control treatment. The average in the control treatment was 1.8 (OD) superior to chitosan and salicylic, in addition to its superiority in inhibiting the rate of spores germinating the pathogenic fungus. The results of applying the factors on the stages of maturity (Turning, Pink ,Light Red) showed the efficacy of bacterial treatments with a concentration of ml. in increasing the activity and effectiveness of each POD and PAL enzyme, where the treatment led to an increase in the activity of POD enzyme to 20.03, 19.2, 19.03 min/gm fresh weight compared to with and with the control treatment in which the enzyme level was 8.13, 6.42 , 6.3 min/gm fresh weight, respectively, as well as the superiority of bacteria over all other factors.
طلب نسخة من الملف
الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.