الكشف المظهري والجيني لبعض عوامل الضراوة لبكتريا الإشريكية القولونية الممرضة المعوية المسببة للإسهال

الباحث

أنعام مطر باقر الموسوي

المشرف

أ.د. أحلام كاظم نعيم الياسين

الجامعة

جامعة الكوفة

الكلية / القسم

التربية للبنات / علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Enteropathogenic E. coli;Virulence Factors;Diarrhea;Molecular Detection

يعد الاسهال احد أهم الامراض المسببة للوفيات في الدول النامية ، فهو المسؤول عن ارتفاع نسبة الوفيات عالمياً الى 2200 طفل / يوم ٠، اذ تعد بكتريا Enteropathogenic Escherichia coil هي المسبب لحالات الاسهال الحاد لدى الاطفال . هدفت هذه الدراسة الحالية الى التحري عن انتشار عزلات 7250/الضارية لدى المرضى المصابين بالاسهال الحاد وذلك عن طريق تحديد بعض عوامل الضراوة مظهرياً ووراثياً . تم جمع 100 عينة براز من الاطفال المصابين بالاسهال الحاد دون سن ال5 سنوات والمراجعين لمستشفى الزهراء التعليمي خلال الفترة من سبتمبر 2021 إلى نوفمبر 2021. نميت جميع العينات وسط الماكونكي الصلب ووسط الايوسين - المثلين الازرق الصلب EMB) ) لتشخيص بكتريا EPEC اجرى تشخيص مظهري وجزئي لبعض عوامل الضراوة باستخدام الطرق الزرعية وتنقية تفاعل انزيم البلمرة المتسلسل وعلى التوالي . اظهرت النتائج انتشار واسعة لمرض الاسهال الناتج عن الاخماج المعوية البكتيرية لدى الاطفال دون سن الخامسة من العمر لوحظت اعلى نسبة اصابة ضمن الذكور ( 30) 12 والاناث ( 35) 7 ضمن الفئة العمرية 13-7 شهر . أظهرت نتائج زراعة جميع عينات البراز لغرض التحري عن وجود 0 المسببة للإسهال ان اعلى نسبة اصابة ببكتريا EPEC كانت ضمن الذكور(0055) مقارنة مع الاناث ( 045؟9 ) .تم cli 30 عزلة عشوائياً لغرض التحديد المظهري والجزئي لبعض عوامل الضراوة المرتبطة بإمراضيه البكتريا واظهرت النتائج ان 14( 046/؟ ) عزلة من بكتريا EPEC كانت لها القابلية على انتاج انزيم البروتيز وان جميع العزلات (0100,؟ ) كانت لها القدرة على انتاج الغشاء الحيوي اذ ابدت 030؟ من العزلات قابلية كبيرة على انتاج الغشاء الحيوي بينما %20 و9050 من العزلات اظهرت مقدرة متوسطة وضعيفة لانتاج الفيلم الحيوي وعلى التوالي . اشارت النتائج الى قابلية 6 ( %20( AY Je فقط تحليل الدم وكان التحلل من النمط الفا — وبيتا . اظهرت نتائج تقنية تفاعل انزيم البلمرة المتسلسل للكشف عن 44/ ان 19( 9,063 ) عزلة كانت حاملة للجين بظهور ناتج تضخيم بحجم جزئي 521 زوج قاعدي Lats كانت 25 ( 9083 ) عزلة حاملة لجين fimH اذ لوحظ وجود ناتج تضخيم بحجم جزئي 508 زوج قاعدي .كما اظهرت نتائج الترحيل الكهربائي على هلام الاكاروز نواتج تضخيم جين csgA و tir ان 21 ( 9070 ) و20( %66( عزلة كانت حاملة للجين بظهور حزمة ذات حجم جزئي 200زوج قاعدي و 556 زوج قاعدي وعلى التوالي. لتقييم انتشار EPEC OY je الضارية تم تحليل نتائج دراسة الخصائص المظهرية والجينية للعزلات . Ging النتائج ان 9023 من العزلات كانت حاملة للجينات الاربعة المدروسة مع قابليتها على انتاج الغشاء الحيوي والبروتيز والهيمولاسين بينما 9/010 من العزلات كانت حاملة GU جينات فقط ) بأنماط مختلفة ) وابدت قابليتها على انتاج الغشاء الحيوي والهيمولاسين فقط, ستنتج ان انتشار واسع لعزلات EPEC WAS المرتبطة بمحالات الاسهال الحاد Cus لوحظ انتشار واسع للعزلات الضارية الحاملة لجميع الجينات المدروسة وكانت لها القابلية على التعبير المظهري لعوامل الضراوة المدروسة لدى الاطفال دون سن الخامسة من العمر والذين يعانون من الاسهال الحاد.

Diarrhea situation are known as one of the most common causes of morbidity and mortality in developing countries. Accordingly, these diseases have global mortality rates estimated to be around 2200 children every day. Where Enterpathogenic E.coil ( EPEC) is represented a world- wide cause of acute infantile diarrhea. This study aimed to investigate the prevalence of virulent Enterpathogenic E.coil isolates among patients with severe diarrhea by phenotypic and genotypic detection of some virulence factors . A total of 100 stool samples have been collected from children under 5 years old with severe diarrhea whom admitted to AL-Zahra Teaching hospital during the period from September 2021 to November 2021. All samples undergoes culturing on MacConkey agar and Eosin-Methylene Blue agar (EMB) for detecting of EPEC. Phenotypic and Genotypic detection of some virulence by using culturing methods and PCR Technique respectively. The results showed a wide distribution of diarrhea resulted from Enterpathogenic E.coil gastroenteritis's among children under 5 years old . A high percentage of infection occurred among male12(30%)and female7(35%) with age group 7-13 month . The results of culturing of all stool samples for detection of EPEC that cause diarrhea showed a high percentage of infection with EPEC occurred among male (55%) compression with female (45%) . Thirty isolates of EPEC have been selected randomly for phenotypic and genotypic detection of some virulence factors associated with its pathogenicity and the results showed that 14(46%) isolates of EPEC have the ability to produce protease and all isolates (100%.) that have the ability for biofilm formation where 30% of isolates gave strong biofilm formation while 20% , 50% of isolates showed moderate and weak biofilm formation respectively . The results of hemolysis ability of all 30 isolates showed that 6 (20%) of isolates gave positive results for hemolysis with α- β hemolysis pattern. The results of PCR technique for detection of lifA showed that 19(63%) isolates have lifA gene by appearance of the amplicon with molecular weight 521 bp , while 25(83%) isolates were carried fimH where 508bp amplicon has occurred. Also agarose gel electrophoresis of amplicon resulted from amplification of csgA and tir genes showed that 21(70%) isolates and 20(66%) isolates were possess these gene by the of amplicon with molecular weight 200bp and 556bp respectively . To evaluate the prevalence of virulent EPEC isolates the results of phenotypic and genotypic characters have been analyzed . The results showed that 23% of isolates possess all four studied genes with ability to produce biofilm formation , protease and hemolysin . While 10% of isolates that possess three genes only ( different pattern) showed the ability to produce only biofilm formation and hemolysis In conclusion. A wide distribution of EPEC associated with server diarrhea was observed where a high prevalence of virulent EPEC isolates that possess all studied virulence genes and showed the ability to the phenotypic expression of studied virulence factors was observed among children under 5 years with severe diarrhea.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب