فعالية البكتريا Lactobacillus rhamnosus في إنتاج فيتامين B12 المعزولة من منتجات الألبان المحلية واستعماله لمعالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية

الباحث

علي بدر نجم الجنابي

المشرف

أ.د. عذراء هرجان محسن

الجامعة

جامعة الكوفة

الكلية / القسم

الزراعة / علوم الأغذية

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

Lactobacillus rhamnosus;فيتامين B12;منتجات الألبان;فقر الدم

أجريت الدراسة الحالية في جامعة الكوفة للمدة من( 10/ 2021 الى 7/ 2022 ( و تضمنت الدراسة أختبار قدرة بعض البكتريا لإنتاج فيتامين By و تحديد العزلات الأكفأ للإنتاج و إستعمالها لمعالجة فقر الدم في الحيوانات المختبرية واظهرت النتائج ما يأتي: إذتم عزل 8 أنواع بكتيرية تعود للجنس Lactobacillus من مصادر غذائية كالحليب الخام و اللبن الرائب و الأجبان المحلية ، فضلاً عن ذلك تم الحصول على عدد من العزلات المشخصة من مختبرات مركز الأمين للتقانات الأحيائية تمثلت في Streptococcus) thermophilus Bacillus cogulance, Bacillus clussi, Bacillus subtils, (Bifidobacterium spp, أظهرت النتائج أن لجميع GY pall البكتيرية القابلية على انتاج فيتامين By, عند تنميتها على وسط الأختبار Bi assay medium وخضعت جميع العزلات لعملية غربلة لتحديد الأكفأ منها في إنتاج فيتامين ج13 تحت ظروف نمو مختلفة و بينت النتائج أن العزلة Lactobacillus rhamnosus هي الأكفأ في انتاج الفيتامين. اختبرت قابلية كل GY pall المدروسة على إنتاج فيتامين Byy باستعمال اوساط مختلفة شملت 3 أوساط زرعية حسب نوع العزلة البكتيرية ( Brain heart ، MRS broth و حليب خالي الدسم ) وأظهرت النتائج أن اعلى انتاج للفيتامين كان بأستخدام وسط MRS للعزلة rhamnosus 10211111 اذ بلغت كميته 308.460ميكروغرام/لتر. من جانب آخر حددت الظروف الزرعية المثلى لإنتاج فيتامين و8 بواسطة بكتريا rhamnosus إذ تم أختبار قدرتها على انتاج فيتامين Bio تحت ظروف مختلفة،؛ إذ أشارت النتائج إلى أن الرقم الهيدروجيني 7 هو الأمثل لإنتاج فيتامين وب18 من قبل بكتريا 5 :ه وجد أن درجة حرارة الحضن المثلى لإنتاج فيتامين و,8 هي 30 ،Po فيما يتعلق بتأثير مدة الحضن على إنتاج فيتامين ,8 لوحظ أن مدة 3 أيام هي الأفضل في انتاج الفيتامين و بينت النتائج أن إضافة أقل تركيز من كلوريد الكوبالت أعطى انتاجية عالية من الفيتامين بالمقارنة مع التراكيز الاعلى المضافة، فضلاً عن ذلك أن أفضل مصدر كربوني هو السكروز Sucrose من بين ثلاث مصادر كربونية شملت الكلوكوز و الفركتوز و السكروزء و أظهرت نتائج الدراسة ان افضل مصدر نيتروجيني هو الببتون Peptone بالمقارنة مع مستخلص الخميرة إذ اعطى اعلى انتاج من فيتامين 812. اختبرت فعالية فيتامين By المستخلص على الحيوانات المختبرية بتركيز 2 و4 ميكروغرام/مل و المصابة بالأنيميا و مقارنته بفيتامين By التجاري إذ لوحظ ارتفاع معنوي في عدد كريات pall الحمر RBC مقارنة مع معاملة السيطرة للحيوانات المصابة بفقر الدم control لوحظ عند معاملة الحيوانات المختبرية بمستخلص Byy بتركيز(2 46( ميكروغرام/مل الأثر الإيجابي برفع معنوي لمعدل تركيز الهيموغلوبين HGB الى )13.48 ، 15.2) غم/100مل على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة control إذ كانت (11.9)غم/100ملفضلاً عن ذلك ارتفع الهيموغلوبين HGB عند حقن الحيوانات بفيتامين و8 التجاري )13.75 ,12.1( غم/100مل للتركيزين 4,2 ميكروغرام/مل على التوالي مقارنة مع معاملتي السيطرة. أما عدد كريات الدم البيض WBC لوحظ ارتفاع معنوي مقارنة مع معاملة السيطرة Leis control لوحظ انخفاض معدل الصفيحات الدموية PLT معنوياً الى 325 ميكرولتر/ 10° مقارنة مع معاملة السيطرة01زم، إذ كانت 346 ميكرولتر/ ?10 أما عند حقن الحيوانات بمستخلص فيتامين By فقد | PLT edi معنوياً الى (334.5, 387.5) ميكرولتر/ 107 للتركيزين (4,2) ميكروغرام/مل على التوالي فضلاً عن ذلك ارتفع معدل الصفيحات الدموية عند المعاملة ب و,8 التجاري للتركيزين 4,2 ميكروغرام/مل )331.2 ,334.7( ميكرولتر/ 10° على التوالي مقارنة مع معاملة السيطرة Control من جانب آخر أختبرت قابلية تأثير فيتامين و8 على فعالية أنزيمات الكبد إذ أوضحت النتائج إنخفاض أنزيم ALT و أنزيم AST لكل المجاميع مقارنة مع معاملة السيطرة12871 والتي تمثل الحيوانات المختبرية غير المصابة بالأنيميا Ld الكوليسترول TC فقد أنخفضت نسبته ونسبة الدهون الثلاثية TG و نسبة البروتينات واطئة الكثافة LDL أما البروتينات عالية الكثافة HDL فقد أرتفعت بالمقارنة مع معاملة السيطرة841'1 . من Age أخرى أظهرت نتائج الزراعة النسيجية للأعضاء(الكبد و الطحال) المأخوذة من الحيوانات المختبرية عدم حصول تغيرات مرضية نسيجية واضحة مقارنة مع معاملة السيطرة أما الكلية فقد لوحظ احتقان بسيط بالأنسجة و عدم وجود تغيرات نسيجية واضحة مقارنة مع معاملة السيطرة.

The current study was conducted at the University of Kufa for the period from (10/ 2021 to 7/ 2022), and the study included testing the ability of some bacteria to produce vitamin B12 and identifying the most efficient isolates for production and using them to treat anemia in laboratory animals. The results showed the following: Eight bacterial species belonging to the genus Lactobacillus were isolated from food sources such as raw milk, yoghurt and local cheeses. In addition, a number of diagnosed isolates were obtained from the laboratories of Al-Amin Center for Biotechnology, represented by (Streptococcus thermophilus, Bacillus cogulance, Bacillus clussi, Bacillus subtils). The results showed that all bacterial isolates were able to produce vitamin B12 when grown on B12 assay medium, and all isolates underwent a sifting process to determine the most efficient ones in producing vitamin B12 under different growth conditions. Vitamin production. The ability of all studied isolates to produce vitamin B12 was tested using different media, which included 3 culture media according to the type of bacterial isolate (MRS broth, Brain heart and skimmed milk). The results showed that the highest vitamin production was by using MRS medium for isolate Lactobacillus rhamnosus, with its quantity reaching 308.460 μg/L. On the other hand, the optimal culture conditions were determined for the production of vitamin B12 by Lactobacillus rhamnosus bacteria, as their ability to produce vitamin B12 was tested under different conditions. The results indicated that pH 7 was optimal for the production of vitamin B12 by Lactobacillus rhamnosus bacteria. The optimum incubation temperature for the production of vitamin B12 is 30 °C. With regard to the effect of the incubation period on the production of vitamin B12, it was noted that 3 days was the best in the production of the vitamin. The results showed that adding the lowest concentration of cobalt chloride gave a high production of the vitamin compared to the highest added concentrations. In addition, the best carbon source is sucrose among the three carbon sources, including glucose, fructose and sucrose. The results of the study showed that the best nitrogen source was peptone compared to yeast extract, which gave the highest production of vitamin B12. The effectiveness of the extracted vitamin B12 was tested on laboratory animals at a concentration of 2 and 4 μg/ml suffering from anemia and compared with commercial vitamin B12. A significant increase in the number of red blood cells RBC was observed compared to the control treatment of anemic animals. The positive effect was observed when laboratory animals were treated with B12 extract at a concentration of (2,4) μg/ml, with a significant increase in hemoglobin concentration HGB to (13.48, 15.2)g/100ml, respectively, compared to the control treatment, which was (11.9)g/100ml. Hemoglobin HGB when injecting animals with commercial vitamin B12 (13.75, 12.1) g/100 ml for the two concentrations of 24, μg/ml, respectively compared with the two control treatments. As for the number of WBC white blood cells, a significant increase was observed compared to the control treatment, while the platelet rate of PLT was significantly reduced to 325 μl/103 compared to the control treatment, which was 346 μl/103. When the animals were injected with vitamin B12 extract, the PLT increased significantly to ( 334.5, 387.5) μl/103 for the two concentrations (24, μg/ml, respectively) In addition, the platelet rate increased when treated with commercial B12 for the two concentrations, 24, μg/ml (331.2, 334.7) μl/103 respectively compared to the control treatment . On the other hand, the ability of vitamin B12 to affect the activity of liver enzymes was tested, as the results showed a decrease in ALT and AST enzymes for all groups compared with the control treatment RAT1, which represents laboratory animals without anemia. As for the high- density protein HDL, it was increased compared to the control treatment RAT1. On the other hand, the results of tissue culture of organs (liver and spleen) taken from laboratory animals showed no clear histological changes compared with the control treatment.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب