عزل وتشخيص الفطريات المسببة لمرض تعفن البذور وموت بادرات الخيار ومكافحتها حيوياً باستخدام التكامل بين بعض الأصناف والعامل الأحيائي Trichoderma longibrachiatum

Isolation and Identification of Fungi Causing Damping Off Disease on Cucumber and Controlling it by Using the Integration of some Cultivars with Trichoderma longibrachiatum
البحث في الرسائل
الباحث
غفران محسن باشه
المشرف
أ.م.د. عقيل عماد محمد
الجامعة
جامعة الكوفة
الكلية / القسم
الزراعة / وقاية النبات
الشهادة
ماجستير
السنة
2022
لغة الرسالة
عربي
الكلمات المفتاحية
موت البادرات;الخيار;Trichoderma longibrachiatum;المكافحة الحيوية

الملخص

يعد مرض تعفن البذور وموت بادرات نبات الخيار من الأمراض المهمة التي تسبب خسائر اقتصادية فادحة لمهاجمة مسببات المرض للبذور والبادرات في مراحل نموها الاولى و توفر الظروف البيئية الملائمة لانتشار المرض,هدفت الدراسة الحالية الى عزل المسببات الفطرية لمرض تعفن البذور وموت البادرات من عدة حقول في محافظة النجف الاشرف والتي شملت حقول (العباسية والقزوينية والمناذرة والمشخاب والحيدرية) وتشخيص تلك المسببات مظهريا وجزيئيآ واختبار حساسية أصناف مختلفة من الخيار لمرض تعفن البذور وموت البادرات وامكانية مقاومتها حيويا. تم عزل المسببات المرضية لمرض تعفن البذور وموت البادرات من جذور وسيقان نباتات الخيار التي جمعت من المناطق المدروسة وتم تشخيص العزلات الفطرية مظهريا وتم اجراء اختبارات المقدرة الإمراضية عليها وكذلك تم اختبار حساسية أربعة أصناف من الخيار هي F1 ومتءمن5ر(نكرسا),1 2 Hybrid ,(-)Cucumber short,(!2S)Beit alpha (55¢)cucumber لعزلات الفطر الممرض في المختبر والحقل وبوجود العامل الاحيائي .Trichoderma longibrachiatum بينت نتائج العزل والتشخيص المظهري الحصول على 17 عزلة 925 2 spp. hall sFusarium 5 عزلات تعود للفطر Rhizoctonia solani وعزلة واحدة تعود للفطر Macrophomina phaseolin في حين أظهرت نتائج اختبار المقدرة الإمراضية لعزلات الفط ر .مم5 Fusarium و phaseolinas R.solani .74 في GUE! بتري الحاوية على الوسط الغذائي P_DLA والتي تم اجراؤها مختبريا تباين هذه العزلات في امراضيتها لبذور صنف الخيار Superina FI ,واتضح أن عزلة واحدة تعود للفطر Fusarium spp. و عزلة اخرى تعود للفطر R. solani كانت شديدة الإمراضية حيث Gal الى تعفن البذور وموت البادرات بنسبة %90 4100.5 للفطرين على التوالي مقارنة مع النسبة المئوية لانبات بذور صنف الخيار Superina Fl التي بلغت 96100,واختزلت تلك العزلتين ايضا مؤشرات نمو نبات الخيار (وزن وطول الرويشة, وزن وطول الجذير) واستخدمت تلك العزلات في الدراسات اللاحقة. وأكدت نتائج التشخيص الجزيئي بأستخدام تقنية تفاعل البلمرة التسلسلي( +2©1) Polymerase Chain Reaction للعزلات الفطرية شديدة الإمراضية انها تعود للفطرين 1 و Gus R solani سجلت في المركز الوطني الامريكي لمعلومات التقانة الحيوية (NCBI) ال GenBank تحت ارقام الادخال ON394603) accession numbers و 7 للفطرين على التوالي. بينما اوضحت نتائج اختبار حساسية اصناف الخيار ( (Hybrid cucumber,Cucumber short,Beit alpha F1,Superina F1 لعزلات الفطر R.solani 5 F.solani المدروسة ان الصنف Cucumber short و11 Beit alpha كانا اكثر حساسية للاصابة بمرض تعفن البذور وموت البادرات مقارنة بالصنف- Hybrid 1 الذي كان متوسط الحساسية للاصابة بالمرض والصنف 171 Superina الذي كان أقل حساسية للاصابة بالمرض واتضح ذلك من خلال قياس مؤشرات نمو النبات المدروسة. وبينت نتائج اختبار المقدرة التضادية أن الفطر الاحيائي longibrachiatum !7 يمتلك مقدرة تضادية عالية ضد الفطرين الممرضين Rsolani sF.solani عند استخدام عملية الزرع المزدوج في اطباق بتري وبلغت درجة التضاد 2 للفطرين ,كذلك عمل الفطر الاحيائي T. longibrachiatum على زيادة مؤشرات نمو النبات المدروسة عند اضافته لوحده اومع المعاملات الاخرى المضاف اليها الفطر الممرض في الاصص البلاستيكية الحاوية على التربة المعقمة وغير المعقمة التي تم إجراؤها مختبريا ووفر حماية لنباتات الخيار من الاصابة بمرض تعفن البذور وموت البادرات, واظهرت نتائج التجربة الحقلية تفوق معاملة الفطر الاحيائي .7 71+ في معدل وزن وطول المجموع الخضري حيث بلغ tel معدل لهما 0 غم و 7.67سم على التوالي بينما سجل اقل معدل لوزن وطول المجموع الخضري في معاملة الفطر R.solani الذي بلغ 0.00غم 0.00سم على التوالي. وسجل اعلى معدل لوزن وطول المجموع الجذري في معاملة الفطر 7١ longibrachiatum والذي بلغ 0.47 غم و5.96 سم على التوالي,بينما سجل اقل معدل لوزن وطول المجموع الجذري في معاملة rail! 7 والذي بلغ فيها 0.00 غم و0.00 سم على التوالي,وتفوق الصنف 1*1 Superina تفوق معنوي في وزن وطول المجموع الخضري و المجموع الجذري. وتوصلت الدراسة الحالية الى امكانية استخدام اصناف مقاومة من نبات الخيار لتقليل من مرض تعفن البذور وموت بادرات الخيار Gus اظهر الصنف 1*1 Superina (نكرسا) مقاومة لهذا المرض بالاضافة الى ان استخدام الفطر الاحيائي 7١ longibrachiatum وفر حماية لنباتات الخيار وشجع نموها الخضري والجذري.

Abstract

Damping off on cucumber is one of important diseases that cause destructive losses due to the infection of seeds and seedlings in early stages of growth particularly in favourable conditions of the pathogens. Current study aimed to isolate the fungal pathogens of the disease in various sites of Najaf province including (Abasia, Quzwenia, Haydaria, Manathera and Meshkab), identification of these pathogens morphologically and molecularly, testing the susceptibility of some commercial cultivars of cucumber to the disease and the potential of controlling it biologically. Pathogenic fungi were isolated from roots and stem parts of cucumber plants that collected from studied sites then diagnosed morphologically. The pathogenicity test was conducted on fungal isolates and the susceptibility of four different cucumber varieties (Superina F1, Beit alpha F1, Cucumber short and Hybrid cucumber) to these isolates was tested in laboratory and field with the presence of the fungal bio-control Trichoderma longibrachiatum. Results of the morphological isolation showed that 17 isolates of Fusarium spp. 5 isolates of Rhizoctonia solani and one isolate of Macrophomina phaseolina were obtained. Pathogenicity test on Petri plates contained P.D.A medium level of pathogenicity of these isolates on seedlings of cucumber Superina F1as one isolate of Fusarium spp. and another isolate of R. solani found to be very virulence which increase the percentage of damping off on seedlings up to 90and 100% respectively compare to control treatment of the four studied varieties that recorded 100% and reduced vegetative and root growth indicators of cucumber plants (the weight and the length of plumule, the weight and the length of radicale) and these isolates were chosen to complete the later studies. Results of molecular diagnoses of the very virulence isolates using polymerase chain reaction (PCR) indicated that these isolates are belonging to F. solani and R. solani as both isolates were registered in National Center for Biotechnology Information (NCBI) under ON394603 and ON398997 accession numbers respectively. Results of the susceptibility of the four studied different cucumber varieties showed that Cucumber short and Beit alpha F1varieties were more susceptible to the infection by damping off pathogens compare to moderate susceptibility in Hybrid cucumber, while Superina F1 showed less susceptibility which clearly indicated in the studied vegetative and root growth indicators of cucumber plants. Results of antagonistic test showed that T. longibrachiatum has high antagonistic ability against F. solani and R.solani when using double culture method in Petri plates as the antagonistic degree reached 2 for both fungi.The bio-control agent also increased the studied growth indicators when it was added alone or with pathogenic fungi in plastic pots contained sterilized and non- sterilized soils and provided a protection to cucumber plants against damping off disease. Field experiment results showed that T. longibrachiatum treatment was exceeded in the average of plumule weight as it gave 0.80g, while the lowest average of plumule weight recorded in R. solani treatment amounted0.00g. Superina F1 treatment was significantly exceeded in plumule weight and length as it reached 0.34g and3.39cm, and the highest average of plumule length was achieved in T. longibrachiatum treatment recording 7.67cm, while the lowest length recorded in R. solani treatment amounted 0.00cm. T. longibrachiatum treatment was achieved the highest average of radical weight and length that reached 0.47g, 5.96cm and the lowest radicale weight and length was recorded in R. solani treatment amounted 0.00cm.Superina F1 treatment was also significantly exceeded in radicale length as it gave 2.58cm. This study suggests the possibility of using Superina F1 variety to eliminate damping off disease on cucumber as it showed less susceptibility to the pathogens of disease. In addition, the use of T. longibrachiatumwas provided a protection to cucumber plants with enhancing the vegetative and root growth indicators. weight and length was recorded in R. solani treatment amounted 0.00cm.Superina F1 treatment was also significantly exceeded in radicale length as it gave 2.58cm. This study suggests the possibility of using Superina F1 variety to eliminate damping off disease on cucumber as it showed less susceptibility to the pathogens of disease. In addition, the use of 7. longibrachiatumwas provided a protection to cucumber plants with enhancing the vegetative and root growth indicators.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.