عزل وتشخيص أنواع من بكتريا الرايزوبيوم من نباتات محلية مختلفة ودراسة فعاليتها المضادة لعدد من المايكروبات

الباحث

عمر حماد جمعة

المشرف

رعد حساني سلطان علاوي - مهدي صالح عبد الرحمن

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية التربية للعلوم الصرفة / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

بكتريا الرايزوبيوم ; العقد الجذرية ; الفعالية المضادة ; تثبيت النايتروجين

Wel في هذه الدراسة عزل وتنقية 42 عزلة من LES الرايزوبيوم من العقد الجذرية لنباتات مثبتة للنايتروجين مختلفة والّتي جُمعت من مناطق Vel) وبيئية مختلفة من محافظات نينوى والأنبار ويغداد ودهوك/العراق، وكانت عزلات الرايزوبيوم 0727 و0129 AN عزلت في هذه الدراسة من العقد الجذرية lil خف الجمل Bauhinia purpurea L. لم يتم تثبيت جنسها ونوعها في المصادر لحد الآن. Diy مرة في العالم تم تسجيل عزل بكتريا الرايزوبيوم 0 من العقد الجذرية لنبات الكاتالبا.1 Catalpa speciose وإذ لم يتم تسجيل مثل هذه العلاقة التعايشية في العالم (على حد علمنا) كما ولم يؤشر هذا مسبقًا في المراجع العلميّة، وأظهرت الاختبارات البايوكيميائية قابلية جميع عزلات الرايزوبيا ad الدراسة على النمو على وسط الرايزوبيا الأدنى .Rhizobial Minimal Medium كما أظهرت النتائج قدرة جميع عزلات الرايزوبيوم على استغلال السترات كمصدر وحيد للكاريون، ماعدا العزلات R. grahamii 5 ,0126 والمعزولة من العقد الجذرية لنبات الليوسينيا Leucaena leucocephala L. والعزلة 0129 والمعزولة من العقد الجذرية لنبات خف الجمل -Bauhinia purpurea L. وتباينت قابلية العزلات على تمييع الجلاتين، كما أظهرت أغلب عزلات الرايزوبيا قيد الدراسة نتيجة موجبة لاختبار ثلاثي السكر والحديد Triple Sugar Iron ، أظهرت جميع عزلات الرايزوبيوم المدروسة نتيجة موجبة لاختبار الكاتاليز والأوكسيديزء أظهرت نتائج أختبار استغلال سكريات مختلفة أنَّ عزلات الرايزوبيا لها القابلية على استغلال الكلوكوز والكالاكتوز والارابينوز والفركتوز والمالتوز والزايلوز واللاكتوز ويدرجات متباينة، في حين أفضل مصدر كاريوني للنمو كان سكر الكحول المانيتول؛ Uy جميع عزلات الرايزوبيا المدروسة أظهرت قابليتها على تحمل تراكيزن مختلفة من كلوريد الصوديوم NaCl ولحد تركيز %6.0 ما عدا العزلة Mesorhizobium loti OJ33 إذ كانت حساسة لملح كلوريد الصوديوم عند هذا التركيزء فيما تباينت الحساسية والمقاومة للمضادات الحياتية المدروسة، إذ أظهرت جميع عزلات الرايزوبيا المدروسة الحساسية تجاه المضاد الحيوي Ciprofloxacin بتركيز 10 مايكروغرام/مل. كذلك تباينت مقاومة عزلات الرايزوبيا المدروسة للمعادن الثقيلة المختلفة؛ إذ أظهرت معظم العزلات تحملاً واضحًا لملح المعدن الثقيل خلات الرصاص الثنائي 151:000(2©) Pb ويتركيز 100 مايكروغرام/مل: وأظهرت جميع عزلات الرايزوبيا نتيجة موجبة لإنتاج جزيئات سطح الخلية وأفضل إنتاج للسكر المتعدد الخارجي كان بمعدل 280 ملغم/مل من العزلة R. eguminosarum by. viciae OJ4 وأظهرد ت نتيجة دراسة deal) المضادة المايكروبية للراشح الزرعي الخام لعزلات الرايزوديا فعاليّة لأغلب العزلات المرضية المدروسة؛ إذ بلغ أعلى معدل bi تثبيط 15.3 ملم عند تطبيق راشح مزرعة التخمير لبكتريا grahamii .78 العزلة 1 تجاه العزلة المرضية Klebsiella pneumoniae AS63 في حين أعلى معدل قطر تثبيط بلغ 16.6 ملم عند تطبيق راشح مزرعة التخمير للعزلة 0131 والمعزولة من العقد الجذرية abil الباركنسونيا Parkinsonia aculeata L. تجاه العزلة المرضية لداء المبيضات Candida albicans 3 وأعلى معدل قطر تثبيط بلغ 13.3 ملم عند تطبيق راشح مزرعة التخمير للعزلة leguminosarum bv. phaseoli OJ6 .7 تجاه العزلة الممرضة للنبات Aspergillus niger 1 وأظهرت نتائج تطابق تسلسل القواعد النايتروجينية للجين rRNA 165 لأربع عزلات رايزوبية منتخبة، وهي العزلة الأولى 0127 والمعزولة من العقد الجذرية لنبات خف الجمل و،العزلة الثانية 0130 والمعزولة من العقد الجذرية لنبات الكاتالبا والعزلة الثالثة 20131 والمعزولة من العقد الجذرية لنبات الباركنسونيا والعزلة الرابعة 0132© والمعزولة من العقد الجذرية لنبات الالبيزياء ان نسبة التطابق للعزلات كانت للعزلة الأولى OJ27 5 مع العزلة القياسية 117203.1 tal ،Rhizobium nepotum 39/7 NR العزلة الثانية OJ30 فقد تطابقت بنسبة 9098.12 مع العزلة القياسية Rhizobium <leguminosarum bv. viciae USDA 2370 NR_118339.1 وفيما يخص العزلة الثالثة فقد Caled وبنسبة 9098.42 مع العزلة القياسية Rhizobium .g/ycinendophyticum NR_165782.1 أَمّا العزلة الرابعة فقد تطابقت وبنسبة %97.89 مع العزلة القياسيّة 14904 -Rhizobium leguminosarum strain LMG a

A In this study, a 42 different rhizobial isolates were obtained and purified from a nitrogen fixing plants. The isolates were collected from root nodules of different rural areas in Nineveh, Al- Anbar, Baghdad Governorates, and Duhok-Kurdistsn/Iraq. Rhizobial isolates OJ27, OJ29 are first isolated from Bauhinia purpuria L., Where are still unkown and were not mentioned in the literatures up to date. For a first time in the world (up to our knowledge), New isolates OJ30 were isolated from Catalpa speciose L. Biochemical tests revealed that all isolates are able to grow on Rhizobial Minimal Medium, whereas isolates were variant in their ability to liquefy gelatin. All the isolates were able to utilize citrate as a sole carbon source, except of R. grahamii OJ26, OJ35 which were isolated from Leucaena leucocephala L. and Bauhinia purpuria L., respectively. Most of the isolates showed a positive result to Triple Sugar Iron test. Sugar alcohol mannitol were preferred by all the rhizobial isolates as a sole carbon source. Most of the isolates tolerated to NaCl up to 6.0% concentration, except the isolate Mesorhizobium loti OJ33 which was sensitive to this concentration. There were variations in sensitivity and resistance to antibiotics, All the isolates showed sensitivity to Ciprofloxacin 10 μg/ml. There was variation in resistance against heavy metals. Most of the isolates showed a clear resistance to Pb (CH3COO)2 (100 μg/ml). All the isolates showed a positive result for production of cell surface molecules and the maximum EPS production average were 280 mg/ml by the isolate R. leguminosarum bv. viciae OJ4. Antimicrobial activity study revealed that a maximum mean inhibition zone was 16.6 mm when a culture supernatant of OJ31 rhizobial isolated from root nodules of Parkinsonia aculata L. against Candida albicans AS43. A maximum mean inhibition zone value was 13.3 mm when a culture supernatant of OJ6 applied against a pathogenic fungi Aspergillus niger BI1. Sequence aligment of S rRNA sequencing --- page 176 [OCR+] --- Isolation and Characterization of Rhizobial Bacterial species from Different Local Plants and Study Their Antimicrobial Activity Against Some of Microbes A Thesis Submitted By Omar Hammad Jumaah To The Council of College of Education for Pure Science University of Mosul In Partial Fulfillment of Requirements for The Degree of M. Sc. In Biology Supervised By Assist. Prof. Assist. Prof. Dr. Raad Hassani Sultan Allawy Dr. Mahde Saleh Assafi 2022 A.D. 1443 A.H. [OCR of page] Isolation and Characterization of Rhizobial Bacterial species from Different Local Plants and Study Their Antimicrobial Activity Against Some of Microbes A Thesis Submitted By Omar Hammad Jumaah To The Council of College of Education for Pure Science University of Mosul In Partial Fulfillment of Requirements for The Degree of M. Sc. In Biology Supervised By Assist. Prof. Assist. Prof. Dr. Raad Hassani Sultan Allawy Dr. Mahde Saleh Assafi 2022 A.D. 1443 A.H. --- page 177 [OCR+] --- Isolation and Characterization of Rhizobial Bacterial species from Different Local Plants and Study Their Antimicrobial Activity Against Some of Microbes Omar Hammad Jumaah M. Sc. Thesis Biology Supervised By Assist. Prof. Assist. Prof. Dr. Raad Hassani Sultan Allawy Dr. Mahde Saleh Assafi 2022 A.D. 1443 A.H. University of Mosul College of Education For Pure Science [OCR of page] University of Mosul fe) College of Education SL fe For Pure Science م Isolation and Characterization of Rhizobial Bacterial species from Different Local Plants and Study Their Antimicrobial Activity Against Some of Microbes Omar Hammad Jumaah M. Sc. Thesis Biology Supervised By Assist. Prof. Assist. Prof. Dr. Raad Hassani Sultan Allawy Dr. Mahde Saleh Assafi 2022 A.D. 1443 A.H.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب