التحري عن علاقة عزلات Salmonella enterica serovar Typhi في تكوين حصى المرارة والدور التثبيطي للكابسيسين على خطوط الخلايا السرطانية

الباحث

ساهرة ادريس حميد أحمد السنجري

المشرف

أميرة محمود محمد الراوي

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

دكتوراه

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

السالمونيلا التيفية ; حصى المرارة ; الكابسيسين ; الخلايا السرطانية

Salmonella enterica serovar Typhi الدراسة الحالية اهتماماً بالتحري عن جرائيم cal وعلاقتها بتكون حصى المرارة وسرطان المرارة من العينات المرضية والتي شملت (S. Typhi) من المرضى الذين Fresh tissue من نسيج المرارة Luc و30 Bile عينة من سائل الصغراء 0 يعانون من حصى المرارة و20 عينة من المرضى المؤكد اصابتهم بسرطان المرارة والمثبتة بالفورمالين ويشكل اكثر Formalin Fixed Paraffin Embedded (FFPE) والمحفوظة بشمع البارافين وضوحاً شملت الدراسة عدة محاور. تضمن المحور الاول تشخيص جرائيم S.Typhi وبنسبة %6.66)2( من عينات سائل الصفراء و %33.3)10( من نسيج المرارة Fresh tissue باستخدام طرائق الزرع الروتينية والاختبارات الكيموحيوية وتقنية الفاتيك 2 والتحري عن بعض جينات الضراوة FliC-d و CdtB باستخدام تقنية تفاعل سلسلة البلمرة Polymerase Chain Reaction (PCR) لتأكيد انتشار جرثومة S.Typhi بين المرضى المصابين بحصى المرارة وسرطان المرارة وبينت النتائج إن نسبة عزل جرثومة S. Typhi من المرضى المصابين بحصى المرارة %46.6)14( مقارنة بنتائج العزل الروتينية وبنسبة %64.3)9( في الإناث و %35.7)5( لدى الذكور فيما بلغت نسبة عزلها من المرضى المصابين بسرطان المرارة وحصى المرارة Les %40)8( منها 62.5(5) من الإناث و 3 للذكور. وركز المحور الثاني على تصميم جهاز مزرعة مستمرة جديد محلياً مع استخدام وسط Birlliant Green Bile Broth (BGBB) ولقحت المزرعة المستمرة بجرثومة “S. Typhi واظهرت النتائج تكون تجمعات كروية بأحجام مختلفة ولوحظ زيادة حجم الحصى المتكون في نهاية التحضين؛ درست SSA) بلورات الكوليسترول وكاريونات الكالسيوم المكون للحصى باستخدام المجهر الضوئي والفلورسيني والمجهر الالكتروني الماسح وشخصت المجاميع الفعالة باستخدام تقنية طيف الاشعة تحت الحمراء Fourier Transforms Infrared Spectroscopy (FTIR) - وتناول المحور الثالث التحري عن فعالية الكابسسين المستخلص من نبات الفلفل الحار على انتاج متعدد السكريات وتكوين الحصى باستخدام نظام المزرعة المستمرة وبينت النتائج ان للكابسسين فعالية لتثبيط انتاج متعدد السكريات وتثبيط تكوين حصى الكوليسترول عند التركيز 0 مايكروغرام/ Paw فضلاً على ما تقدم توصلت الدراسة الى أن للكابسسين المستخلص تأثيراً ساماً على خطوط الخلايا السرطانية باستخدام اختبار MTT وبالتراكيز 400، 200، 100، 50، 25، 12.5 مايكروغرام/ سم3 على الخطين الخلويين، خط خلايا سرطان المرارة 0415 وخط خلايا سرطان وبينت النتائج ان الكابسسين اعطى WRL 68 مقارنة مع خط الخلايا الطبيعية CaCo-2 القولون بلغت Led اعلى نسبة تثبيط على خلايا 0415 بلغت %57.5 عند التركيز 400 مايكروغرام/ سم3 وبلغت %55.6 عند التركيز 400 مايكروغرام/ CaCo-2 اعلى نسبة تثبيط للكابسسين على خلايا WRL68 سم3 ولوحظ عدم وجود تأثير عالي على خط الخلايا الطبيعي تضمن المحور الرابع دراسة قابلية جراثيم 1ام/5.15 على تخليق دقائق الفضة النانوية بالاعتماد على التغير الوني من الاصفر الفاتح الى اللون البني وتم توصيف دقائق الفضة النانوية المخلقة حيوياً Ultra Violet Spectrum )1[17- مطياف الاشعة فوق البنفسجية Gad باستعمال تقنيات عدة Fourier Transforms Infrared Spectroscope (FTIR) وطيف الاشعة تحت الحمراء Vis) والمجهر الالكتروني النافذ X- Ray Diffraction (XRD) وتقنية حيود الاشعة السينية -Transmission Electron Microscope (TEM)

A This study focused on the investigation on the Salmonella enterica serovar Typhi (S.Typhi) and its relationship to the formation of gallstone and gallbladder cancer. The study included 30 samples of bile fluid, 30 samples of fresh gallbladder tissue from patients suffering from gallstone, and 20 samples of formalin-fixed paraffin embedded (FFPE) gallbladder tissue from patients confirmed with gallbladder cancer infection. The study included of several parts. The first part included the diagnosis of S.Typhi with 6.66% of the bile fluid samples and 33.3% of the fresh gallbladder tissue using conventional methods, biochemical tests, and theVitek2 technique and detection of the FliC-d and CdtB genes using polymerase chain reaction (PCR) to confirm the prevalence of S.Typhi among patients with gallstones and gallbladder cancer. The results showed a 46.6% positivity for S.typhi among patients infected with gallstones compared with conventional methods more precisely, it was 64.3% for females and 35.7% for males. While the results showed a 40% positive with gallbladder cancer, it was 62.5% for females and 37.5 % for males. The second part focused on the design of a noval continuous culture for the first time locally. Brilliant green bile broth (BGBB) was used, and the continuous culture was inoculated with S. Typhi. The results revealed formation of spherical aggregations of various sizes. Moreover, it was observed that there was an increase in the size of the stone that formed at the end of the incubation. The morphology of cholesterol and calcium carbonate crystals were studied using light, fluorescent and scanning electron microscopes, and the functional groups were diagnosed using the (FTIR) technique. B The third part of the study deals with the investigation of the effectiveness of capsaicin extracted from the chili plant on the polysaccharide production and cholesterol stones formation by using the continuous culture system. The results showed that capsaicin was effective in inhibiting the polysaccharide production and cholesterol stones formation at concentrations of 50 μg/ml. In addition to the above, the study concluded that the extracted capsaicin had a toxic effect on cancer cell lines using the cytotoxicity test (MTT). The concentrations 400, 200, 100, 50, 25 and 12.5 g/ml were used on the two cell lines the gallbladder cancer cell line G415 and the colon cancer line CaCo-2 compared with the normal cell line WRL68. The results showed that capsaicin caused highest inhibition percentage (57.5% for G415) at the concentration of 400 g/ml, While highest inhibitory percentage of capsaicin on CaCo-2 was 55.6% at a concentration of 400 g/ml, and there was no large effect observed against the normal cell line of WRL68. The fourth part of the study consisted of studying the ability of S. Typhi isolates to biosynthesize the silver nanoparticles based on the colour change from pale yellow to brown. The biosynthetic silver nanoparticles were characterised using several techniques, including the ultraviolet spectrum (UV-vis), a Fourier transform infrared spectroscope (FTIR), X-ray diffraction (XRD), and a transmission electron microscope (TEM).

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب