دراسة كيموحيوية وجزيئية لتأثير مركبي Liposomal amphotericin B و Thalidomide والتآزر بينهما لمعالجة اللشمانيا الجلدية والأحشائية

الباحث

نسمة ادريس صالح عبد القادر المعماري

المشرف

هيثم لقمان شهاب الحيالي

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2022

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

اللشمانيا ; الأمفوترسين اللايبوسومي ; الثاليدومايد ; التآزر الدوائي

تناولت هذه الدراسة تحديد التأثير السمي لعقاري الامفوترسين اللايبوسومي ب والثاليدومايد والتأزر بينهما على بروماستكوت Promastigote اللشمانيا الجلدية م7010 2 .1 واللشمانيا الاحشائية L. = donovani وايجاد التركيز القاتل ل %50 Inhibition (ICs0) Concentration 5 %90 (1090) عند الطور اللوغاريتمي 72 ساعة. وقد تراوحت التراكيز المثبطة ل %50 من النمو لعقار الثاليدوميد ما بين (12.5-10) مايكروغرام/ مل وللامفوترسين اللايبوسومي ب (5) مايكروغرام/مل والتراكيز المثبطة ل %90 من النمو لعقار الثاليدومايد مابين (30-25) مايكروغرام/مل وللامفوتريسين مابين )25-20( ماكروغرام/مل لكل من اللشمانيا الجلدية والاحشائية وكان تركيز التأزر بين العقارين لكلا النوعين ل 0 تثبيط gail كلا النوعين من الطور المسوط عند الطور اللوغاريتمي 72 dels (0.5 + 2.5) و(2 + 2.5) مايكروغرام/ مل. كما درس عدد وزمن الجيل للعقارين والتأزر بينهماء إذ أدت زيادة التراكيز الى خفض عدد الجيل بواقع (3.98-0.52) جيل لبروماستكوت اللشمانيا الجلدية و(4.19-0.25) جيل لبروماستكوت اللشمانيا الاحشائية لكلا العقارين و(5.69-1.89) جيل لبروماستكوت اللشمانيا الجلدية و (5.80-1.40) جيل لبروماستكوت اللشمانيا الاحشائية للتأزر بين العقارين عند الفترات )24، 48، 72، 96( ساعة. ولحظ ظهور زيادة في زمن الجيل مع ازدياد التراكيز المستخدمة للعقارين مع ازدياد فترة التعريض فقد تراوحت ما بين (68-24) ساعة بالنسبة للشمانيا الجلدية و(65-22) ساعة للشمانيا الاحشائية وكان زمن الجيل للتأزر بين العقارين بواقع (17-12) ساعة للشمانيا الجلدية و(18-11) ساعة للشمانيا الاحشائية. ووجد تأثير واضح للأدوية المستخدمة والتأزر بينهما على المظهر الخارجي وحدوث تغير في الشكل العام للطفيلي من المغزلي الى البيضويء ،gy SM وغير المنتظم او المتحلل وتغير شكل السوط او حتى فقدانه. Gore سمية العقارين باجراء فحص تحديد الجرعة المميتة الوسطية على الجرذان البيضاء البالغة نوع Albino وقد بلغت لعقار الثاليدومايد 4870 ملغم/ كغم وللمضاد الامفوترسين اللايبوسومي ب 3322 ملغم/ كغم وكانت نتيجة الدمج بين العقارين للثاليدومايد 3274 وللامفوترسين 7 ملغم/كغم. بالنسبة للمستوى الجزيئي فقد درس تأثير الادوية المستخدمة على عدد من المورثات للنوعين من الطفيلي عند الطور اللوغاريتمي اذ اظهرت نتائج الترحيل الكهريائي لناتج تضخيم السلسلة الداخلية للشمانيا الجلدية والاحشائية كليهما توافق )7757( Internal Transcribed Spacer] المستنسخة )2.5+2 ،2.5+0.5 ،10 ،5 ،C) T مع الحزم الرئيسة للعينات جميعها المستخدمة الجلدية مايكروغرام/ مل المعاملة وغير المعاملة (السيطرة) )2.5+2 ،2.541 ،12.5 .5 ،C) والاحشائية(1 الى جنس اللشمانيا. aged م3226 مما يدل على انها (Base pair) عند الحزمة القياسية Kinetoplastid Membrane ظهر من الترحيل الكهربائي لناتج تضخيم موروث ال (10 <9) 5 تباين وراثي في الحزم (4، 5) لطفيلي اللشمانيا الجلدية apes (KMPII) Protein لطفيلي اللشمانيا الاحشائية أي حدوث تثبيط من الأدوية المتأزرة مما يدل على الحد من عملية تضخيم الجسيم الحركي ونمو الخلايا والحد من حركتها وتقليل اعداد الطور المسوط. (NDI) NADH Dehydrogenase! ظهر من نتائج الترحيل الكهربائي لتضخيم موروث وراثي في الحزم رقم )4 5) )9 10) لنوعي اللشمانيا الجلدية والاحشائية على cals الى وجود التوالي مما يدل على أن تأثير الادوية المتأزرة كان على عملية انتاج الطاقة نتيجة لذلك قلت فعالية تثبيط للايض الخلوي للمايتوكوندريا ومن ثم الحد من تكاثرها واعدادها. Gas الطفيلي أو قد ظهرت في نماذج برماستكوت Athy حسب النتائج التي تم الحصول عليها وجدت تباينات اللشمانيا الجلدية لثلاث نماذج معاملة بالأدوية. ومن الجدير الذكر بان الشكل التطوري للمعاملات الدوائية جميعها ونماذج السيطرة قد ثبت بالشكل الشجري وجود بعض التوافقات ووجود تغيرات جينية National Center Botechnology والتي سجلت في المركز الوطني لمعلومات التقنات الاحيائية لطفيلي اللشمانيا الجلدية. مما دل على أن تأثير العلاج التأزري كان ناجحاً (NCBI) Information Kinetoplastid Membrane في تثبيط نوعي اللشمانيا والحد من نموها فضلا عن عد المورثات هدفا جيدا للتأثيرات العلاجية. (VDI) NADH Dehydrogensel و (KMPII)

A The present study drives the poisonous effect of the liposomal amphotericin B, thalidomide and synergism between them on L. tropica and L. donovani promastigote then found the inhibitory concentration 50% (IC50) and 90% (IC90) at loge phase 72 hours. The 50% inhibitory concentration ranged of thalidomide treatment from(10-12.5) μg/ml and of liposomal amphotericin B (5) μg/ml and 90% inhibitory concentration of thalidomide (25-30) μg/ml but liposomal amphotericin B (20-25) μg/ml for both L. tropica and L. donovani when the synergism ranged from (2.5 + 0.5) and (2.5 +2) μg/ml of L. tropica and L. donovani at loge phase 72 hours. Additionally, the results had indicated that liposomal amphotericin B, thalidomide and synergism between them affected the generations number by (0.52-3.98) and (0.25-4.19) generations of L. tropica and L. donovani promastigotes respectively, as well (1.89-5.69), (1.40-5.80) generations for the synergism treatment at (24, 48, 72, 96) hours. Moreover, observe increases in generation time with increasing of concentration. The ranged had (24-68) hours for L. tropica, (22-65) hours for L. donovani and for the synergism treatment was (12-17) hours for L. tropica, (11-18) hours for L. donovani. Likewise demonstrated that the synergism treatment caused a marked change in promastigote morphology from spindle to oval, spherical, irregular and decomposing from in addition to change in the flagellum shape or even lost it. On the other hand, the toxicity of the two drugs was determined by conducting an examination of the median lethal dose on albino rats. It was 4870 mg/kg for thalidomide and 3322 mg/kg for liposomal amphotericin B whereas the synergism result was 3267 mg/kg for thalidomide and 1887 mg/kg for liposomal amphotericin B. B Furthermore, the synergistic effect at the molecular level was studied by affecting on a number of genes for both types of parasites at the log phase, the results of electrophoresis of amplification product (ITS1) Internal Transcibed Spacer 1 for (CL) Cutanous Leishmaniasis and (VL) Visceral Leishmaniasis showed agreement with the main bands of all samples used cutaneous T (C, 5, 10, 0.5+2.5, 2+2.5) and visceral D (C, 5, 12.5 1+2.5, 2+2.5) μg/ml at the standard band 322 bp indicating that it belongs to the genus leishmania. The (KMPII) Kinetoplastid Membrane Proten II gene amplification product mentioned a discrepancy in hetero packages bundles (4, 5) for L. tropica and(9, 10) for L. donovani. That is, the occurrence of inhibition by the synergistic drugs, and this is evidence of limiting the process of kinetoplast doubling, cell growth, limiting their parasites movement and reducing the flagella number. Whereas the results of amplification of the (ND1)NADH Dehydrogenase gene showed genetic variation in the packets (4, 5) and (9, 10) of the two types of leishmania CL and VL respectively, this indicates that the effect of synergistic drug is on the energy production process, and as a result the activity of parasite is reduced or inhibition of cellular metabolism of mitochondria may occur, this limiting their proliferation and numbers. It is worthy to mention that the evolutionary form all drug treatments and control samples has been proven by the tree shape and the presence of some concordances, as well as genetic variations which have been recorded in (NCBI) National Center Biotechnology Informaton,s for the cutaneous leishmaniasis parasites, and this demonstrates that all concentrations especially the synergistic ones, were successful in inhibiting the two types of leishmania a limiting its growth. Additionally, may conceder KMPII and ND1 as a good target for therapeutic effects.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب