علاقة المحتوى البلازميدي بمقاومة البكتريا المرضية المعوية تجاه المضادات الحيوية والمعادن الثقيلة والمبيدات الحيوية

الباحث

سمير مجو خلف علي التتر

المشرف

محسن ايوب عيسى العكيدي

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2023

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Plasmids ; Enteric Bacteria ; Antibiotic Resistance ; Heavy Metals

A تلعب البلازميدات دورًا Lage في عملية التطور البكتيري، Cus إنها تساهم في تعزيز مقاومتها لمضادات الميكروبات وبالتالي امراضيتها من خلال حمل الجينات المقاومة لمضادات الميكرويات. لذلك فإن انتشارها بين المجتمعات البكتيرية يشكل تهديدًا خطيرًا للصحة العامة على مستوى العالم. هدفت الدراسة الحالية إلى تحديد دور البلازميدات في مقاومة المضادات الحيوية والمعادن الثقيلة والمبيدات الحيوية في بعض الجرائيم المعوية ( 117 :0157 Escherichia coli ،Escherichia coli Serratia marcescens ،Klebsiella pneumoniae ٠ و (Enterococcus faecalis التي تم الحصول عليها من قسم علوم الحياة/كلية العلوم/جامعة الموصل © بالإضافة إلى التحقق من التوزيع و انتشار جينات مقاومة هذه العوامل المضادة للميكروبات على كروموسوم وبلازميد البكتيريا المدروسة. تم اختبار حساسية العزلات المدروسة تجاه 12 نوعاً من أصناف مختلفة من المضادات الحيوية ، وتراكيز مختلفة لخمسة أنواع من المعادن الثقيلة على USS أملاح © وثلاثة أنواع من المبيدات الحيوية. أظهرت النتائج أن جميع العزلات كانت متعددة المقاومة لمضادات الميكرويات ، حيث سجلت أعلى مستويات المقاومة للمضادات Aztreonam) ig!) و Cefotaxime و (Cefixime بنسبة 100/ ، بينما لم تظهر أي عزلة مقاومة للمضاد الحيوي .(Imipenem) فيما يتعلق بمقاومة المعادن الثقيلة والمبيدات الحيوية ، سجلت أعلى مستويات المقاومة تجاه كبريتات النيكل (NISO4) والمبيد الحيوي بوفيدون اليود ،(Povidone-Iodine) بينما لم تظهر العزلات أي مقاومة تجاه كلوريد الزئبق ( .(HgoCl, أظهرت نتائج تنميط البلازميد أن جميع العزلات كانت حاوية على البلازميد بمعدل ثلاث حزم لعزلة K. pneumoniae و حزمة بلازميدية واحدة لبقية العزلات. تم إجراء اختبار تحييد البلازميد باستخدام مواد كيميائية مختلفة واختبار الحساسية لجميع العزلات تجاه مضادات الميكرويات المستخدمة بعد التحييد لإظهار علاقة البلازميد بمقاومة هذه العزلات. أظهرت النتائج قدرة الأكرد (Acridine Orange) jal Guu على إزالة البلازميدات من0157:117 E. coli , marcescenss E. coli .§ و Sodium dodecyl sulfate لإزالة البلازميدات من K. lin pneumoniae لم يظهر Ethidium bromide أي فعالية تحييدية ضد العزلات المدروسة. من ناحية ،ssl لوحظ فرق كبير من خلال النتائج في أنماط الحساسية تجاه مضادات الميكرويات B المستخدمة بين العزلات المدروسة بعد عملية التحييد، مقارنة بمقاومتها قبل التحييد،ء حيث أظهرت النتائج E. coli وصولاً إلى S. marcescens أعلى نسبة فقدان مقاومة تجاه المضادات الحيوية في عزلة الشيء نفسه على المعادن الثقيلة ، فيما عدا أن أقل نسبة فقدان Gibby والتي سجلت أقل نسبة فقدان. والتي كانت أيضًا العزلة الوحيدة التي فقدت مقاومتها ، 1. pneumoniae مقاومة كانت في عزلة للمبيدات الحيوية المستخدمة بين جميع العزلات المدروسة. استخدمت تقنية تفاعلات البلمرة المتسلسل (PCR) للكشف عن بعض جينات مقاومة المضادات الحيوية ) بر 15714، 51:11) ، والمعادن الثقيلة ( 20 ، (nec ، و للمبيدات الحيوية (qacEA1) لإظهار وجودها وتوزيعها على كروموسوم و بلازميد العزلات المدروسة ٠، إذ سجلت اعلى نسبة انتشار بين الجينات المدروسة لجينات مقاومة المضادات الحيوبة blacry و 7 sul بمعدل 100/ ، 80/ على الكروموسوم و 100/ ، 100/ على البلازميد على التوالي ، بينما لوحظ حدوث جينات مقاومة المعادن الثقيلة czcA و 762 بمعدل 100/ : و 40/ على الكروموسوم ، و 80/ ، 20/ على البلازميد على التوالي ، وأخيراً جين المقاومة للمبيدات الحيوية 00781 بمعدل 780 على الكروموسوم ، و 100/ على البلازميد.

Plasmids play an important role in the process of bacterial evolution, as they contribute to enhance their resistance to antimicrobials and thus pathogenicity by carrying antimicrobial resistance genes. Therefore, their spread among bacterial communities constitutes a serious threat to public health globally. The current study aimed to determine the role of plasmids in antibiotic, heavy metal, and biocidal resistance in some enteric bacterial isolates (Escherichia coli O157:H7, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Serratia marcescens and Enterococcus faecalis) which obtained from the Department of Biology /College of Science/University of Mosul. The study also investigates the distribution and spread of resistance genes of these antimicrobial agents on the chromosome and plasmids of the studied bacteria. The sensitivity of the studied isolates was tested against 12 types of different classes of antibiotics, different concentrations of five types of heavy metals in the form of salts, and three types of biocides. The results showed that all the isolates were multi-drug resistant, as they recorded the highest levels of resistance against antibiotics (Aztreonam, Cefotaxime, and Cefixime) by a ratio of 100%, while no isolate showed resistance to the antibiotic (Imipenem). Regarding the resistance to heavy metals and biocides, the highest levels of resistance were recorded towards nickel sulfate and the biocide povidone-iodine, while the isolates did not show any resistance towards mercury chloride. The results of plasmid profiling showed that all isolates contained the plasmid, with an average of three bands for K. pneumoniae and one band for the rest of the isolates. A plasmid curing test using different agents and a sensitivity test of all isolates towards the used antimicrobials after curing were performed to show the relationship of the plasmid with the antimicrobial resistance of these isolates. The results showed the ability of acridine orange to remove plasmids from E. coli O157:H7, E. coli and S. marcescens, and sodium dodecyl sulfate to remove plasmids from K. pneumoniae, while ethidium bromide did not show any curing activity against studied isolates. On the other hand, a significant difference was observed through the results in the patterns of sensitivity towards the used antimicrobials among studied isolates after the curing process, compared to their resistance towards it before curing. The results showed the highest percentage of losing resistance towards antibiotics in the isolate S. marcescens down to E. coli, which recorded the lowest loss ratio. The same applies to heavy metals, except for that the lowest percentage of loss was in the K. pneumoniae isolate, which was also the only isolate that lost its resistance to the used biocides among all the studied isolates. PCR technique was used to detecting some antibiotic (blaCTX , sul1), heavy metal (czcA , ncc), and biocidal (qacE∆1) resistance genes to showing their presence and distribution on plasmid and chromosome of the studied isolates, as the highest incidence rates of antibiotic resistance genes blaCTX and sul 1 were recorded, with a rate of 100%, 80% on the chromosome, and 100%, 100% on the plasmid respectively. While the occurrence of heavy metal resistance genes czcA and ncc was observed with rates of 100%, 40% on the chromosome, and 80%, 20% on the plasmid respectively, and finally the biocidal resistance gene qacE∆1 by 80% on the chromosome, and 100% on the plasmid.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب