التثبيط المظهري والجزيئي لمقاومة المضادات الحيوية والمطهرات في الزوائف الزنجارية المعزولة من إصابات الحروق في مدينة الموصل

الباحث

عبدالله مروان شاكر محمود الجماس

المشرف

محسن ايوب عيسى احمد العكيدي

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2024

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Pseudomonas aeruginosa ; Antibiotic Resistance ; Antiseptics ; Burn Infections

تعد بكتيريا aeruginosa 2 المقاومة للمضادات الحيوية و المطهرات قد ظهرت كعامل ممرض مميت على نطاق عالمي؛ مسؤولة عن معظم الإصابات والوفيات في مرضى الحروق. هدفت الدراسة الحالية إلى اظهار دور بكتيريا aeruginosa 2 في عدوى الحروق ودراسة مقاومتها للمضادات الحيوية والمطهرات وإمكانية العثور على بدائل علاجية ضد العزلات المقاومة .لهذا الغرضء تم جمع 120 عينة من مرضى الحروق في مركز الموصل التخصصي للحروق والجراحة التجميلية، خلال الفترة من سبتمبر 2023 إلى يناير 2024. أظهرت نتائج العزل والتشخيص أنه تم الحصول على عشرين عزلة من )16.7%( P. aeruginosa باستخدام الاختبارات الزرعية وبعض الاختبارات الكيموحيوية ونظام جهاز الفايتك 2 Vitek وتم تأكيد التشخيص باستخدام الكشف المحدد لجين 777/4 165. تم التشخيص الإضافي لعزلتين بواسطة تسلسلات القواعد النيتروجينية لجين 7777/4 765 المضخم وتم تسجيلهما لاول مرة في بنك الجينات العالمي NCBI بأرقام الوصول الآتية 22524758 -PP514624, تم إخضاع العزلات لاختبارات الحساسية للمضادات الحيوية على مولر هينتون أكار (MHA) ضد 12 مضاد حيوي مختلف و 12 مبيد حيوي مختلف. أظهرت النتائج أن جميع العزلات )100%( اظهرت مقاومة متعددة للأدوية ¢ Gus أظهرت أعلى مستويات المقاومة ضد ثمانية مضادات Jaga Aztronam, Pipracillin, Cefepime, Ceftazidium, Ceftriaxone, Amikacin, ) (Tobramycin, and Rifampin بنسبة مئوية بلغت )100%(، )795( من العزلات كانت مقاومة ل meropenem, levofloxacin and ciprofloxacin ، و55960(17) من العزلات كانت مقاومة ل imipenem . أظهرت نتائج المقاومة للمبيدات الحيوية أعلى مستويات المقاومة ضد سبعة مبيدات حيوية بنسبة )100%(، بينما لم تظهر العزلات أي مقاومة تجاه الصابون الجراحي. تمت دراسة التحري المظهري والجزيئي لبعض آليات مقاومة المضادات الحيوية والمبيدات الحيوية في عزلات Paeruginosa, أظهرت النتائج أن جميع العزلات 20 تنتج إنزيم بيتا- لاكتاماز المحدد بطريقة اليودوميتر وجميع العزلات(100970) كانت تحمل جين 3/700. يعد إنتاج انزيمات Metalo- beta- lactamase MBL مصدر مهم بشكل خاص ضمن عزلات P aeruginosa المقاومة للكاريابينيم ، 6 a) ومن بينها 11 )64.7%( عزلة ظهرت إيجابية لاختبار القرص imipenem )كانت مقاومة ل 7 بشكل إيجابي في سبع عزلات (41.1790). لم تكن VIM تم اكتشاف جين .IMP-EDTA المشترك على imipenem لم تحتوي أي من العزلات الحساسة ل IMP هناك عزلة واحدة )0%( تحمل جين تم استخدام طريقة 2187)00/ لتحديد أنظمة التدفق المفرط التعبير. أظهرت VIM أو IMP جينات وأظهرت نتائج النمط الوراثي أن 19 )95%( من ،gas النتائج أن جميع العزلات )100%( لها نشاط aly (100%) في جميع العزلات gacE Al و()776/؛ بينما لوحظ جين MeXB العزلات تمتلك جينات gacE يؤوي الجين (0%) Niall يلاحظ أي من أظهرت نتائج النشاط المضاد للميكرويات ل 5 احماض عضوية و5 مستخلصات نباتية إيثانولية و16 زيت نباتي والمواد الطبيعية، أظهرت أن حمض الأسيتيك وحامض اللاكتيك لهما نشاط مضاد للميكروبات فعال بتركيز 1.296 و 0.73% على التوالي، بينما أظهر حامض الستريك وحامض الأسكوربيك وحامض السوربييك فعالية مضادة للميكرويات ضد عزلة واحدة بتركيز 0.2490. يمتلك حامض الخليك وحامض اللاكتيك نشاطًا مضادًا للميكروبات عالي الفعالية ضد عزلات Po ai, aeruginosa أثبتت توليفات حامض الخليك / المبيدات الحيوية (1:3 حجم / (ane فعاليتها بشكل كبير وكانت قادرة على إعادة المبيدات الحيوية غير الفعالة إلى الحالة الفعالة. أظهرت نتائج المستخلصات النباتية الإيثانولية أن ثلاثة مستخلصات نباتية لها فعالية محتملة في تثبيط النمو الميكروبي بفاعلية متفاوتة، وهي P. granatum and S. Aromaticum , سل[ coriaria .1 بتراكيز 9.6,12,12 ملغم/مل على التوالي، وأظهرت المستخلصات الثلاثة تأثير تآزري واضح مع المضادات الحيوية؛ وجعلت البكتيريا الأكثر مقاومة للمضادات تتحول للحالة الحساسة. لم تظهر الزيوت النباتية وجل الصبار والعسل فعالية كبيرة ضد عزلات P. aeruginosa

Antibiotics and biocides resistance Pseudomonas aeruginosa was emerged as a deadliness pathogenic agent globally, responsible for the majority of morbidity and mortality in burn patients. The current study aimed to reveal the role of P. aeruginosa in burn infections and investigate its resistance to antibiotics and biocides and the possibility of finding therapeutic alternatives against the resistant isolates , for this purpose 120 samples were collected from burn infection patients in Mosul Specialized Center for Burns and Plastic Surgery, at a period from September/ 2023 to January/ 2024. Isolation and diagnosis results showed that twenty P. aeruginosa isolates (16.7%) had been obtained using cultural , some biochemical tests and Vitek 2 system, and confirmed the identification by specific 16 S rRNA gene detection. Two isolates were further identified by sequencing the amplified 16S rRNA gene, and It was recorded for the first time in the gene bank NCBI at the accession numbers PP514624, PP524758. The isolates were subjected to antibiotics sensitivity test on Muller Hinton Agar (MHA) against 12 various antibiotics, and 12 of different biocides. The results showed that all the isolates (100%) were multi-drug resistance, as they revealed the highest levels of resistance against eight antibiotics (Aztronam, Pipracillin, Cefepime, Ceftazidium, Ceftriaxone, Amikacin, Tobramycin, and Rifampin) at a percentage of (100%), (95%) of the isolates were resistant to Meropenem, Levofloxacin and Ciprofloxacin, and 17 (85%) were resistant to Imipenem. The results of resistance to biocides revealed the highest levels of resistance against seven biocides at percentage of (100%), while the isolates did not show any resistance toward Surgical soap. Phenotypic and molecular detection of some antibiotic and biocides resistance mechanisms in P. aeruginosa isolates were investigated, the results shown that all 20 isolates produce beta-lactamase enzyme determined by iodometric method and all isolates (100%) carried ampC gene. production of Metallo-beta-lactamases MBLs is of particular concern among carbapenem- resistant P. aeruginosa isolates, 17 (85%) were imipenem-resistant, among them, 11 (64.7%) isolates appeared positive for the IMP-EDTA Combined Disc test. The VIM gene is detected positively in seven (41.17%) isolates. Not a single isolate (0%) carried the IMP gene. No one of the imipenem-sensitive isolates harbored the IMP or VIM genes. EtBrCw method was used to identifies overexpressed efflux systems. The results shown all isolates (100%) have efflux activity, our genotypic results shown 19 (95%) of isolates have mexB and mexY genes, while the qacE Δ1 gene was observed in all isolates (100%) and none of the isolates (0%) harboured the qacE gene. The results of antimicrobial activity of 5 organic acids, 5 ethanolic plant extracts, 16 plant oils and natural substances, revealed that acetic acid and lactic acid have effective antimicrobial activity at a concentration 1.2% and 0.73% respectively, while citric acid, ascorbic acid and sorbic acid revealed antimicrobial activity against one isolate at concentration 0.24%. acetic acid and lactic acid have high effective antimicrobial activity against P. aeruginosa isolates, and the combinations of acetic acid / biocides (1:3 v/v) proved significantly effective and it was able for rendering the ineffective biocides to effective state. The results of ethanolic plant extracts revealed that three plant extracts were potentially effective in inhibiting microbial growth with variable potency, R. coriaria L, P. granatum and S. aromaticum at concentration 9.6, 12, 12 mg/ml respectively, and the three extracts revealed clear synergistic effect with antibiotics, and rendering the most resistant bacteria to sensitive state. The plant oils, Aloe vera gel and honey did not show significant efficacy against P. aeruginosa isolates.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب