تأثير العلاج بأنواع مختلفة من الأنسولين على الاستجابة المناعية والتعبير الجيني للجين FOXP3 لمرضى السكر النمط الأول في مدينة الموصل

الباحث

سعد امرير علي عبدالله الجبوري

المشرف

روجان غانم محمد أيوب العلاف

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية العلوم / قسم علوم الحياة

الشهادة

ماجستير

السنة

2023

لغة الرسالة

عربي

الكلمات المفتاحية

الأنسولين ; السكري النمط الأول ; الجين FOXP3 ; الاستجابة المناعية

هدفت الدراسة الحالية إلى متابعة تأثير أنواع الأنسولين الخارجي في السيطرة على مستوى الكلوكوز ومدى تأثر الاستجابات المناعية الخلوية والخلطية بالمعالجة لدى مرضى داء السكر النمط الأول، فضلاً عن تقدير مستوى التعبير الجيني للجين23 (FoxP3 ( Forkhead box احد اهم الجينات المسؤولة عن فعالية الخلايا المنظمة Regulatory T cells لدى مرضى cla السكر النمط الأول. تضمنت الدراسة (80) عينة دم لمرضى مشخصين بإصابتهم بداء السكر النمط الأول لمدة من (5-3) سنواتء تراوحت أعمارهم بين (15- 35) سنة، ومن كلا الجنسين من مراجعين مركز الوفاء لمعالجة مرضى السكر والغدد الصم في مدينة الموصل(خلال المدة من 2021-10-26 إلى 2-13- 2 تم تقسيم المرضى إلى أربع مجاميع اعتماداً على نوع الأنسولين المستعمل للسيطرة على مستوى الكلوكوز تضمنت هذه المجاميع المرضى المستعملين كل من الأنسولين نوع ( الصافي ،Actrapid الخابط Insulatard الصافي والخابط Actrapid/Insulatard ، واخيراً المزيج ،(Mixtard وتضمنت مجموعة السيطرة (25) عينة دم لأشخاص أصحاء (ذكور وإناث) غير مصابين بأمراض انتقالية اوعدوى جرثومية أو أمراض المناعة الذاتية. تضمنت الدراسة ثلاثة محاورء اعتمد المحور الأول (المحور المناعي) على متابعة تأثير أنواع الأنسولين ضمن مجاميع الدراسة الأريعة على بعض المقاييس المناعية الخلوية والخلطية منها الأعداد الكلية لخلايا الدم البيضاءء الأعداد المطلقة للخلايا العدلة، اللمفاوية، الوحيدة calgill الحمضة، الخلايا البلعمية فضلاً عن تقدير تركيز البروتين الكليء الألبومين واخيراً الكلوبيولين. أظهرت نتائج المحور المناعي وجود فروقات معنوية في معدل الأعداد الكلية لخلايا all البيضاءء والأعداد المطلقة للخلايا العدلة، اللمفاوية، الوحيدة calg ill الحمضة:؛ الخلايا البلعمية، ومستوى الكلوبيولين، والبروتين الكلي، الألبومين لدى بعض من مجاميع الدراسة عند مقارنتها مع بعضها فضلاً عن عينة السيطرة عند .(P<0.05) تضمن المحور الثاني (الجزيئي ( قياس مستوى التعبير الجيني للجين FoxP3 إن تم انتخاب )26( مريض من مجموعة الدراسة الكلية والتي ضمت (80) مريضاًء تميز هؤلاء المرضى بسيطرتهم على مستوى الكلوكوز في الدم ضمن حدود ثابتة تراوحت mg/dl) og: 190 -110) ولمدد طويلة، ومؤشر كتلة الجسم Body Mass = Index لديهم تراوح بين )23-20(، وياستعمال تقنية ،qPCR quantitative polymerase chain reaction أظهرر ت نتائج اختبار دنكن لأزواج المقارنات واختبار مستوى المعنوية وجود ارتفاع معنوي في مستوى التعبير الجيني للجين FoxP3 لمجاميع الدراسة QU مع بعضها البعض فضلاً عن عينة السيطرة عند Gus ، (PS0.05) اظهر مجموعة مرضى الخابط اعلى تعبير جيني في حين كان مجموعة مرضى الصافي والخابط اقل تعبيرفي مستوى التعبير الجيني للجين FoxP3 اعتماداً على نتائج المحور الأول (المناعي ) والمحور الثاني (الجزيئي ) تم تنظيم المحور الثالث (المناعي - الجزيئي)، وتم إضافة اختبارين إلى هذا المحورء الاختبار الأول تمثل بقياس تركيز الأنسولين الكلي في مصل المرضى ضمن عينة الدراسة، والاختبار الثاني تمثل بقياس تركيز الببتيد C= لاستخراج تركيز الأنسولين المنتج داخل الجسم. أظهرت نتائج قياس تركيز الأنسولين الخارجي عدم وجود فروقات معنوية في تركيز الأنسولين لدى مجاميع الدراسة مقارنة بعينة السيطرة عند .(P<0.05) وباستعمال برنامج التحليل الإحصائي 5855.25 تم إجراء اختبار علاقة تحليل AY! في محاولة لتحديد مدى تأثر مستوى التعبير الجيني للجين FoxP3 بمستوبات الكلوكوز والأنسولين الخارجي، فضلاً عن قياس مدى تأثير مستوى التعبير الجيني المرتفع للجين 70153 على المقاييس المناعية ضمن الدراسة. أظهرت النتائج عدم وجود علاقة اثر للأنسولين الخارجي على مستوى التعبير الجيني للجين 3 مجاميع الدراسة Aaa! وعلى العكس من ذلك أظهرت النتائج اثر تركيز الكلوكوز في مستوى التعبير الجيني للجين FoxP3 زيادة بنسبة )%26( gal مجموعة المرضى الذين يستخدمون الأنسولين نوع المزيج، في حين أظهرت نتائج تحليل الأثر للكلوكوز على مستوى التعبير الجيني للجين 3 نسبة )%76( لدى مجموعة المرضى الذين يستعملون الأنسولين نوع الخابط عند .(P<0.05) وأظهرت النتائج وجود علاقة اثر لارتفاع مستوى التعبير الجيني للجين FoxP3 على كل من الأعداد المطلقة للخلايا اللمفاوية:؛ الوحيدة النواة، البلعمية والكلوبيولين بنسبة 0 على التوالي Gal مرضى clo السكر الذين يستعملون الأنسولين من نوع (الصافي). واخيراً ظهرت علاقة اثر لارتفاع مستوى التعبير الجيني للجين707853/ على كل من الأعداد المطلقة البلعمية والكلوبيولين بنسبة %296%20 على التوالي لدى مرضى cla السكر الذين يستخدمون الأنسولين من نوع (الصافي والخابط) عند (0>0.05).

A This study aims to follow up the effect of exogenous insulin types in controlling glucose levels and the extent to which cellular and humoral immune responses are affected by the treatment in patients with type 1 diabetes. In addition, it aims to estimate the level of gene expression of the FoxP3, which is one of the most important genes responsible for the activity of regulatory T cells in patients with type 1 diabetes mellitus. The study included 80 blood samples of male and female patients diagnosed with type 1 diabetes for the period of 3–5 years. These patients, who fall in the age range of 15–35 years, visited at the Al-Wafa Center of Diabetics and Endocrinology in Mosulو during 26/10/2021–13/02/2022. The patients were divided into four groups depending on the type of insulin used to control their glucose levels. These groups included patients who used insulin Actrapid, Insulatard, Insulatard/Actrapid or Mixtard. The control group included 25 blood samples of healthy males and females without infectious diseases, bacterial infections, or immune diseases. The study included three axes. The first axis, the immunological axis, was based on following up the effect of insulin types within the four study groups on some cellular and humoral immunological parameters, including the total numbers of white blood cells, the absolute numbers of neutrophils, lymphocytes, mononuclear cells, eosinophils and phagocytes. In addition to the determination of the concentration of total protein, albumin and globulin. The results of the immunological axis showed that there were significant differences in the rates of total number of white blood cells and the absolute number of neutrophils, lymphocytes, mononuclear cells, eosinophils, phagocytes, globulin, total protein and albumin in some of the study groups when compared to each other and to the control sample at P≤0.05. The second axis, the molecular axis, included measuring the level of FoxP3 gene expression in 26 of the 80 patients for long periods. Their body mass index was in the rang of 20–23 . Using quantitative polymerase chain reaction qPCR technology, the results of Duncan’s test for comparison pairs showed a significant increase in the level of FoxP3 gene expression for the four study groups in compared to the control sample at P≤0.05. B Depending on the results of the first immunological axis and the second molecular axis, the third immunological–molecular axis was organised. Two tests were added to this axis. The first test included measuring the total insulin concentration in the serum of patients within the study sample, and the second test included measuring the concentration of peptide-C to extract the concentration of insulin produced inside the body. The results of measuring the concentration of exogenous insulin showed no significant differences in the concentration of insulin in the study groups compared to the control sample at P≤0.05. Using the statistical analysis program SPSS.25, an effect analysis relationship test was conducted to determine the extent to which the level of gene expression of the FoxP3 gene is affected by the levels of glucose and exogenous insulin, in addition to measuring the effect of the high level of gene expression of the FoxP3 gene on the immunological parameters within the study. The results showed that there was no effect of exogenous insulin on the levels of FoxP3 gene expression in the four study groups. On the contrary, the results showed an effect of glucose concentration on the levels of the FoxP3 gene expression in 26% of the group of patients who used insulin Mixtard. Meanwhile, the results of the effect analysis of glucose on the level of gene expression of the FoxP3 gene showed in 76% of the patients who used the Insulatard insulin at P≤0.05. The results also showed an effect of high levels of the FoxP3 gene expression on the absolute numbers of lymphocytes, mononuclear cells, phagocytes, and globulin in 20%, 27%, 23% and 25%, respectively, of diabetic patients who used Actrapid insulin. Finally, there was an effect on the high level of gene expression of the FoxP3 gene on both phagocyte absolute numbers and globulin in 20% and 29%, respectively, of diabetic patients who used insulin Insulatard /Actrapid at P≤0.05.

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب