التأثير المظهري والجزيئي للمعززات الحيوية في نمو بكتريا Salmonella Enteritidis وبعض عوامل ضراوتها
Phenotypic and Molecular Effect of Probiotics on the Growth of Salmonella Enteritidis and Some of its Virulence Factors
- الباحث
- رايا طلال محمود عزيز كداوي
- المشرف
- رسمية عمر سلطان الجبوري
- الجامعة
- جامعة الموصل
- الكلية / القسم
- كلية التربية للبنات / علوم الحياة
- الشهادة
- ماجستير
- السنة
- 2022
- لغة الرسالة
- عربي
- الكلمات المفتاحية
- المعززات الحيوية ; السالمونيلا ; عوامل الضراوة ; التأثير الجزيئي
الملخص
هدفت الدراسة الحالية الى تقييم دور المعززات الحيوية في تثبيط عوامل ضراوة بكتريا Salmonella enterica serovar Enteritidis (S.Enteritidis) على المستوبين المظهري والجزيئي. جمعت 25 عينة خروج من الأطفال بعمر أقل من خمس سنوات المصابين بالإسهال الحاد المراجعين لمستشفى الزهراوي الأهلي في مدينة الموصل للمدة من 2021/7/1 لغاية 2021/9/1. تم الحمصول على عزلة واحدة للنوع S.Enteritidis من العينات بنسبة عزل 4 % وشخصت العزلة اعتمادا على الخواص المزرعية والمظهرية فضلا عن الخواص الكيموحيوية التي تم قياسها بجهاز 2 Vitek أظهر فحص الحساسية للعزلة المحلية قيد الدراسة أنها حسّاسة للمضادات Azithromycin, Ceftriaxone: Levofloxacin ،Ciprofloxacin ومقاومة للمضادات -Ampicillin Amoxicillin—Clavulanic acid ،Trimethoprim-Sulfamethoxazol تم الحصول على أريعة معززات حيوية من مصادر مختلفة شملت ثلاثة أنواع بكتيرية ، ونوع واحد من الخمائر ، وتضمنت الأنواع Pediococcus ، Lactobacillus acidophilus ،Saccharomyces boulardiis Bifidobacterium bifidum ، pentosaceus أختبر التأثير التثبيطي للرواشح الخام للمعززات الحيوية الاريع المذكورة le Lal نمو بكتريا §.Enteritidis بطريقة الانتشار في الحفرء وأظهرت النتائج أنّ الرواشح الأريع جميعها كانت dads لنمو النوع §-Enteritidis وبأقطار biti متباينة، إلا أنّ راشح المعزز الحيوي 25 كان الاكثر تأثيراً بقطر تثبيط بلغ 17 wale دُرس تأثير رواشح المعززات الحيوية على ثلاثة عوامل ضروة لبكتريا82]13)1015آ.ك. وهي الغشاء الحيوي ، الالتصاق بالخلايا الظهارية وحركة العج ، وأظهرت النتائج أنَّ راشحي النوعين L.acidophilus و LIS P.pentosaceus الأكثر كفاءة في تثبيط عوامل الضراوة المدروسة ؛ إذ ثبّطا تكوين الغشاء الحيوي بنسبة 91.6 %، وثبّطا الالتصاق بالخلايا الظهارية البولية بنسبة 9085.7 و71.4 % على التوالي، فضلاً عن تثبيط حركة العج بنسبة بلغت 9635. أدت معاملة العزلة المحلية S.Enteritidis برواشح المعززين الحيوبين L.acidophilus و P.pentosaceus بالتركيز تحت المثبط الأدنى الى انخفاض التعبير الجيني للجين SpvR الى0.14 و0.44 على التوالي ، وكذلك التعبير الجيني للجين invA انخفض الى 0.26 و 6 على التوالي وذلك بقياسها بتقنية التضخيم الكمي الآني Real Time-quantitative Polymerase Chain Reaction(Real Time-qPCR).
Abstract
A The curent study aimed to evaluate the inhibitory role of probiotics on Salmonella enterica serovar Enteritidis (S.Enteritidis)نvirulence factors in morphological and molecular levels. Twenty five stool specimens were collected from children under five years suffering from acute diarrhea hospitalized in Al-Zahrawi Hospital,Mosul city from 1/7/2021 till 1/9/2021. One isolate of S.Enteritidis was obtained from these specimens with incidence rate of 4% , it was identified according to cultural and morphological as well as biochemical characteristics measured by Vitek 2 compact system. Antibiotic sensitivity test revealed that the local isolate was sensitive to Ciprofloxacin, Levofloxacin, Ceftriaxone and Azithromycin but was resistant to Trimethoprim-Sulfamethoxazol, Amoxicillin – Clavulanic acid and Ampicillin. Four probiotics included three bacterial species and one yeast species obtained from different sources were used in this study included Lactobacillus acidophilus, Pediococcus pentosaceus, Bifidobacterium bifidum and Saccharomyces boulardii. The inhibitory effect of the four probiotics cell-free culture supernatants on S.Enteritidis growth using well diffusion method was measured, the results showed that the four cell-free culture supernatants had inhibitory effect on S.Enteritidis growth with different inhibition zones although P.pentosaceus cell-free culture supernatant had the highest inhibitory zone reached 17 mm. The effect of probiotics cell-free culture supernatants on three virulence factors of S.Enteritidis namely biofim , adhesion to epithelial B cells and swarming motility were studied , the results indicated that L.acidophilus and P.pentosaceus cell-free culture supernatants were more effective in reducing virulence factors as biofilm was reduced by the rate of 91.6 %, adhesion on urinary epithelial cells was reduced by the rate 85.7% and 71.4 % respectively, swarming motility also reduced by the rate 35%. Treatment of local isolate S.Enteritidis with sub-MIC cell-free culture supernatant of the probiotics L.acidophilus and P.pentosaceus led to down regulation of the gene spvR to 0.14 and 0.44 respectively and gene expression of the gene invA also down regulation to 0.26 and 0.46 respectively which was tested by Real Time-quantitative Polymerase Chain Reaction(Real Time-qPCR).
طلب نسخة من الملف
الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.