دراسة مظهرية وجزيئية لمضخات الدفق ومثبطاتها لبعض أنواع البكتريا السالبة لصبغة كرام المعزولة من مرضى الحروق في مدينة الموصل
Morphological and Molecular Study of Efflux Pumps and their Inhibitors in Some Species of Gram-Negative Bacteria Isolated from Burn Patients in Mosul City
- الباحث
- إسراء خالد عبد الفتاح عبد الله
- المشرف
- رسمية عمر سلطان الجبوري
- الجامعة
- جامعة الموصل
- الكلية / القسم
- كلية التربية للبنات / علوم الحياة
- الشهادة
- ماجستير
- السنة
- 2023
- لغة الرسالة
- عربي
- الكلمات المفتاحية
- مضخات الدفق ; البكتريا السالبة لصبغة كرام ; مرضى الحروق ; المقاومة الدوائية
الملخص
تهُدف هذه الدراسة إلى الكشف المظهري عن أنظمة الدفق التي تمتلكها بعض انواع البكتريا السالبة لصبغة كرام وهي Klebsiella Pseudomonas 42171/2111050٠ Acinetobacter baumannii Enterobacter 1000© © ،المعزولة من إصابات الحروق وعلاقتها بمقاومة المضادات الحيوية ، إذ جُمعت 50 عينة قيح من حالات التهاب الحروق للمرضى الراقدين في مستشفى السلام التعليمي و المستشفى الجمهوري العام في مدينة الموصل للفترة من 1/7/2022الى 1/9/2022 تم الحصول على 4 عزلات للنوع Acinetobacter baumannii و10 عزلات للنوع Pseudomonas aeruginosa و 5 عزلات للنوع pnemoniae 121625161/0،وعزلة واحدة للنوع Enterobacter cloacae ، وتم العزل والتشخيص اعتمادا على الخواص المزرعية والمظهرية فضلاً عن الخواص الكيموحيوية التي Gund بجهاز الفايتك 2 Vitek ونظام API أظهر فحص الحساسية للمضادات الحيوية للعزلات قيد الدراسة أن اعلى مقاومة كانت للتتراسايكلين و الريفامبيسين والامبيسيلين في حين كانت حساسة للمضادات الجنتاميسين ¢ السيفتراكسون. أظهرت نتائج الكشف المظهري عن مضخات الدفق للأنواع البكتيرية قيد الدراسة بإستخدام طريقة العجلة الخشبية (EtBr CW) Ethedium Bromide —Agar Cartwheel Method ان أغلب العزلات غير متوهجة (نتيجة موجبة) مما يدل على وجود مضخات الدفق فيها ، كذلك إستبدلت صبغة بروميد الايثيديوم بصبغة الاحمر الامن Red Safe لكونها أكثر أماناً وأظهرت نتائج مشابهة . اخثبر التأثير التأري لبعض الادوية والمركبات العضوية(البيبرازين ، الفينوثيازين ، الراببرازول ،الاوميبرازول، البانتوبرازول ، الفيراباميل ،الباروتكسين) مع المضادات الحيوية ضد العزلات قيد الدراسة ، وقد أثبتت النتائج زيادة فعالية المضادات بوجود المثبط (البيبرازين ،الفيراباميل ،الباروتكسين،)حيث ازدادت اقطار تثبيط للمثبط مع المضاد ضد البكتربا اما بقية المواد اثرت بنسبة 675/الى 9050. تم قياس مستوى التعبير الجيني للمورثين adeG ,adeB بإستخدام تقنية Real- Time qPCR للعزلتين الحساسة والمقاومة للنوع baumannii .4 وتبين أن مستوى التعبير الجيني لهذين المورثين كان اعلى في العزلة المقاومة ¢ كما اجري تحليل تتابعي للمورث J6SPRNA للعزلتين الحساسة والمقاومة ورسم الشجرة الوراثية التطورية فضلاً عن تسجيل السلالتين في بنك الجينات العالمي NCBI
Abstract
A This study aims to detect efflux pumps activity in four Gram-negative species, (Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pnemoniae and Enterobacter cloacae) isolated from burn infections fifty pus specimens were collected from burn patients in Al-Salam Teaching Hospital, and Al-jumhory General Hospital in Mosul city , from 1/7/2022 to 1/9/2022. Vitek-2 system and API20E system were used to identify the isolated colonies .four isolates of Acinetobacter baumannii, ten isolates of Pseudomonas aeruginosa, five isolates of Klebsiella pnemoniae, and one isolate of Enterobacter cloacae were choosed . Antibiotic sensitivity results showed high resistance to Tetracycline, Ampicillin and Rifampicin .while three isolates (1,3,6) were resistance to Imipenem ,Amikacin and Ceftraxone . Ethedium Bromide-Agar Cartwheel Method was used to detect efflux pumps activity , the results showed that most of the isolates were nonflourescent which indicate (positive result) , Ethedium Bromide was replaced by Red Safe and the results were identical . The synergistic effect of seven efflux pumps inhibitors included (piprazine ,phenothiazine, Raprazole ,pantoprazole,omprazole, verpamill and parotexine) with the antibiotics aginst the studied .isolates was tested ,the results indicated increase in some antibiotics activity. Real-Time quantitfication PCR was used to detect the gene expression of two efflux pumps genes including adeB and adeG in both resistant and sensitive Acinetobacter baumannii isolates ,the results indicate high level of adeB and adeB expression in the resistant isolate. The gene analysis was achaived for both sensitive and resistant Acinetobacter baumannii isolates inclding 16 srRNA nucleotide sequence and phylogenetic tree.
طلب نسخة من الملف
الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.