الانتشار وبعض عوامل الخطورة مع الدراسة التشخيصية لداء اللستريات في النعاج في محافظة نينوى/العراق

الباحث

هديل عاصم محمد مصطفى

المشرف

مآب إبراهيم الفروه جي - بلسم يحيى رشيد

الجامعة

جامعة الموصل

الكلية / القسم

كلية الطب البيطري / الطب الباطني والوقائي البيطري

الشهادة

دكتوراه

السنة

2024

لغة الرسالة

انكليزي

الكلمات المفتاحية

Listeriosis ; Ewes ; Risk Factors ; Nineveh

هدفت الدراسة إلى تحديد مدى انتشار داء اللستريات في النعاج وعوامل الخطورة المرتبطة به وكذلك تشخيص المرض سريرياً ومختبرياً بأستخدام مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم، والطرائق القياسية للعزل البكتيري، وتفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي للمدة من شباط 5 إلى حزيران YoY جمعت عينات الدم و الدماغ و المشيمة و الحليب و المسحات المهبلية و المرارة بمتوسط أعمارمابين5.١ إلى © سنوات من 45٠ نعجة مصابة تنتمي إلى 5٠ قطيعأ العدد- Lyin ٠٠١١و 85٠078 مجهضأ (محتويات المعدة و الدم و الدماغ) في مناطق مختلفة من محافظة نينوى شمال العراق. تم إستخدام ثلاثة وعشرون نعجة سليمة سريريا (سالبة لاختبار الاليزا غير المباشرو تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل) كمجموعة سيطرة سالبة. تباينت معدلات انتشار داء اللستريات في النعاج حسب طرائق التشخيصء اذ سجلت أعلى المعدلات باستخدام تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل .90١5.7 كان الإجهاض هوالعلامة السريرية Le sub SY) بين علامات المرض تلتها علامات الحركة الدائرية و شلل الوجه الأحادي الجانب و فقدان الشهية و التواء الرأس والتهاب الملتحمة مع ارتفاع معنوي في درجة حرارة الجسم؛ ومعدلات التنفس ومعدلات ضربات القلب مقارنة بتلك التي كانت سليمة سريريا. كان الاجهاض هو الأكثر تسجيلاً خلال الدراسة وبنسبة HAVA مقارنة بالشكل العصبي 9055.7. وبلغت نسبة الإجهاض الإجمالي YIN 5 MVNA من حالات الإجهاض. من خلال التحليل متعدد المتغيرات، فإن معظم حالات cla الليستريات حدثت في النعاج المحلية التي كان عمرها أقل من سنتين ونصف ails; تنتمي إلى قطعان كبيرة خلال فصلي الخريف والربيع. كانت 90١١.5 من النعاج الموجبة مصليأ لاختبار الاليزاغير المباشر.كما لوحظ أعلى معدل إيجابية مصلية في النعاج المجهضة 97١١.١ عند كثافة بصرية > ٠.45٠ مقارنة بالنعاج GIS الأعراض العصبية عند كثافة بصرية > .٠.47١ وكانت النسبة الكلية للعزل البكتيري هي ”.5 % )٠١57/45( .أذ Lal ان الليستيريا المستوحدة(مونوسيتوجينز) 907.5 (55/ 57 )٠١ هي الأكثر عزلا, تلتها اللستريا ايفانوفي .)٠١ 47 /9( 97٠0.5 تباينت معدلات العزل البكتيرية حسب نوع العينة المدروسة. أذ سجلت عينات دماغ الاجنة أعلى نسبة عزل لكل من الليستريا مونوسيتوجينز 907١.5 والليستيريا إيفانوفي 54.5 905، تليها عينات دم النعاج 9077.7 والأجنة 8 وقد لوحظ انحلال الدم من نوع بيتا حول المستعمرات البكتيرية بعد VE ساعة من التحضين عند7” درجة مئوية على وسط أكار الدم. وعلى وسط اكار أوكسفوردء لوحظت مستعمرات صغيرة Arad gad مستديرة، رمادية الى سوداءء قطرها حوالي cae ٠.5 تحدها و مناطق سوداء منتشرة من التحلل المائي للإسكولين. أظهرت نتائج جميع العزلات من كلا النوعين من الجرثومة تفاعلات كيموحيوية نموذجية شملت على انتاج الكتاليز والتحلل المائي للاسكولين ونتائج موجبة لكل من الفوكسبروسكر والمثيل الاحمر وسالبة لكل من اختباري الكلوكوز والمنيتول .كانت GY je اللستريا مونوسيتوجينز Ain ge لتفاعلي الرامنوز والألفا ميثيل, بينما كانت عزلات اللستريا ايفانوفي موجبة للزايلوز فقط . كمالوحظ ظهور مستعمرات الليستريا مونوسيتوجينز بلون أخضر مزرق مع هالة صفراء بينما ظهرت مستعمرات اللستريا ايفانوفي باللون الازرق بدون Alba صفراء عند الزرع على HI Crome™ Listeria ) buy (Agar Base / Modifie M1417 أما النسبة الإجمالية للفحص الجزيئي كانت YY Y .)2٠١47/19( وظهرت الليستيريا مونوسيتوجينز بنسبة )١17117/٠١57( 90١7.١ تليها جراثيم الليستريا ايفانوفي بنسبة (YY\Y EY) 90١.57 تم ايداع عزلتين لكل من الليستيريا مونوسيتوجينز و الليستريا ايفانوفي في بنك الجينات تحت ارقام انضمام هي HMB2 listeriolysin, (LC769365.1) HMB1 listeriolysin ((LC769366.1) = امالليستريا الايفانوفي (0Q983887.1) LIVANOVII31 (0Q983888.1.) LIVANOVIIS3, كانت OY je الليستريا مونوسيتوجينزموجبة لعوامل الفوعة inkj و hly وبنسبة 100 % في حين كانت نسية عوامل inIA 4¢ sill و ActA 4 , %73.6 كما تم تسجيل عوامل الفوعة في بنك الجينات بواقع عزلتين لكل جين HMB/J2internalinJgene ,HMBJlinternalin Jgene بارقام1. 100769367 , (LC769373.1) ,HMBinlA1 internalinA gene , LC769368.1 و ( 10769374 HMBLLOZ2 listerolysin O gene, HMBLLOI listerolysin O gene , (.1 (LC769369.1) و (LC769371.1) HMBactA2 , HMB actAl ,(LC769370) , LS (LC769372.1) تم تسجيل معامل ارتباط موجب قوي ما بين كل من تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل واختبارالاليزاغيرالمباشر في حين كان معامل الارتباط متوسط مابين تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل وطرائق الزرع البكتيري. اما التحليل التطوري لليستيريا مونوسايتوجينيز ولليستريا ايفانوفي متطابقين بنسبة (11.5- 45 على التوالي ومتطابقين بنسبة (013.94-35.5/) مع السلالات المستودعة في بنك الجينات في العديد من دول العالم Cue سجلت عتراللسترياالمستوحدة تطابق مع ie البلدان التالية (استراليا, الولايات المتحدة الامريكية ,بولندا, الصين,روسيا,كندا,المانياإجنوب افريقيا). في حين سجلت عتر اللستريا ايفانوفي تطابق مع عتر البلدان التالية (الولايات المتحدة الامريكية,تركيا , المانيا,فرنسا).

a The study aims to determine the prevalence of listeriosis in ewes and the risk factors related to it, The prevalence diagnose of the disease clinically and laboratory using anti-listeriolysinO (LLO) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (i-ELISA), standard double enrichment method of bacterial culture, and conventional polymerase chain reaction (c-PCR) techniques during the period from February 2022 to June 2023. The specimens were obtained from 450 diseased ewes (Blood, Brain, Placenta, Milk, Vaginal Swabs and Gall bladders) with an average age of 1.5 to 5 years old who belonged to 50 flocks N= 8408 and 100 aborted fetuses (Brain, Blood and Stomach contents) in various regions of Nineveh Governorate, Northern Iraq. In complet information of twenty-three clinically healthy ewes negative for i- ELISA and c-PCR were used as control negative. The prevalence of listeriosis in ewes is varied according to diagnostic methods, as the highest were recorded using c-PCR 15.3%. Listeric abortion was the most frequent clinical signs followed by circling movement, unilateral facial paralysis, twisting of head and conjunctivitis, significant P<0.05 recorded in body temperature, respiratory rates and heart rates of infected ewes compared to who are clinically healthy. Abortive form 92.8% of the disease was significant recorded during this study compared to the neurological form 65.2% During the study period, the total abortion rate was 12.6% and 23% of aborted cases were caused by Listeria . From Multivariable analysis, most cases of listeriosis occurred in local breed ewes that were less than two and a half years old and belonged to large flocks during the autumn and spring seasons. Anti- Listeriolysin O antibodies were identified in 11.5% the highest prevalence was observed in aborted ewes 12.1% at > 0.450 optical densities than in those with neurological symptoms 10.7% at > 0.420 optical densities. The overall percentage of bacterial isolation was 4.3% (45/1042). Listeria. monocytogenes 3.5% (36/1042) was the most prevalent Listeria spp. b Detected, followed by Listeria.ivanovii 0.9% (9/1042). Bacterial isolation rates varied according to the type of sample. Fetus brain samples had the highest percentage of isolation of both Listeria.monocytogenes 30.6% and Listeria. ivanovii 4.4% followed by blood samples of diseased ewes 22.2% and aborted fetuses 13.9% . The overall prevalence of molecular detection was 13.3% (139/1042). Listeria. monocytogenes 12.1% (127/1042) was the most prevalent Listeria spp, detected followed by Listeria.ivanovii 1.2% (12/1042), two Listeria. monocytogenes strains HMB1 listeriolysin, HMB 2 listeriolysin deposited in GenBank under accession numbers LC769365.1 and LC769366.1 and two isolates of Listeria. ivanovii were deposited in GenBank under accession numbers OQ983887.1 and OQ983888.1. All strains of Listeria. monocytogenes were positive 100% for inlJ and hylA genes ,while only 93.4% and 73.6 % of bacterial isolates were positive for inlA and actA genes respectively , two strains were virulence factors of Listeria .monocytogenes deposited in GenBank under accession numbers were HMBJ1 internalin J gene and HMBJ2 internalin J gene LC769367.1, LC769368.1, HMBinlA1 internalin A gene, HMBin2A1 internalin A gene. LC769373.1, LC769374.1, HMBLLO1 listeriolysinOgene, HMBLLO2 listeriolysinOgene LC769369.1, LC769370.1, HMBactA1 actin-assembly inducing protein precursor gene, HMBactA2 actin- assembly inducing protein precursor gene) LC769371.1and LC769372.1. Astrong positive correlation coefficient was recorded between indirect ELISA and c-PCR techniques, while it was a medium positive correlation coefficient between bacterial culture and c- PCR techniques. The phylogenetic analysis of Listeria monocytogenes and Listeria. ivanovii were 99.4-99.54 % identical and 99.50-99.79 % identical to sequences deposited in the GenBank of many countries respectively. Listeria.monocytogenes (Australia, USA, Poland, China,

طلب نسخة من الملف

الملفات غير منشورة على الموقع. اترك بياناتك وسيتواصل معك موظفو قسم الشؤون الثقافية والفنون لإرسال النسخة مجاناً.

الاسم

رقم الهاتف

البريد الإلكتروني

الغرض من الطلب (اختياري)

إرسال الطلب